  Danh hiệu: Thành viên gắn bóNhóm: Thành viên chính thức
Gia nhập: 23-10-2006(UTC)
Bài viết: 578
Đến từ: SG
Cảm ơn: 2 lần
Được cảm ơn: 17 lần trong 12 bài viết
|
Phương pháp điều trị HIV mới
Các nhà nghiên cứu Israel vừa phát triển một phương pháp mới có thể dẫn đến bước đột phát trong việc điều trị bệnh AIDS.
Phương pháp này tiêu diệt những tế bào bị nhiễm HIV mà không
gây tổn hại đến những tế bào khỏe mạnh. Những phương pháp điều trị hiện
nay tập trung vào việc hạn chế sự tái tạo của HIV.
Công trình đã được 4 nhà nghiên cứu Abraham Loyter, Aviad Levin, Zvi Hayouka và Assaf Friedler cho đăng trên tạp chí AIDS Research and Therapy (Anh) số ra tháng 8. Báo Haaretz (Israel)
cho biết nhóm nghiên cứu này đã đăng ký bằng sáng chế đối với phương
pháp trên ở Israel. Dù vậy, phương pháp phải được thử nghiệm trên động
vật và con người.
Theo Người Lao Động
| Đối với thế giới, bạn chỉ là một người;
Nhưng đối với một người, bạn là cả thế giới... |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
 Danh hiệu: Thành viên gắn bóNhóm: Thành viên chính thức
Gia nhập: 03-10-2005(UTC)
Bài viết: 94
Cảm ơn: 1 lần
Được cảm ơn: 5 lần trong 3 bài viết
|
Tiến bộ mới trong nghiên cứu điều trị bệnh AIDS
Các nhà nghiên cứu khoa học Israel vừa cho biết họ đã đạt được một bước tiến mới trong công tác nghiên cứu điều trị căn bệnh AIDS.
Đây có thể coi là bước đột phá trong nỗ lực tìm ra phương pháp điều trị căn bệnh thế kỷ này một cách hữu hiệu nhất.
Theo một bài báo được công bố trong ấn bản mới nhất của tạp chí Anh "AIDS Nghiên cứu và trị liệu", phương thức điều trị mới này có thể phá hủy các tế bào nhiễm virus AIDS mà không làm tổn hại đến tế bào khỏe mạnh trong cơ thể.
Các nhà nghiên cứu tại Đại học Hebrew của Jerusalem đã phát triển phương pháp điều trị dựa trên nghiên cứu polyme của các axit amin. Các nhà khoa học Israel cho biết công việc nghiên cứu đang đạt được nhiều dấu hiệu rất khả quan. Điều này có thể sẽ giúp cho nền y học thế giới có liệu pháp điều trị mới chống lại căn bệnh AIDS.
Phương pháp điều trị mới này sẽ được thử nghiệm thêm nữa trên động vật, sau đó sẽ tiến hành thử nghiệm lâm sàng trên người.
Theo báo cáo của Tổ chức phòng chống AIDS của Liên Hợp Quốc, tính đến cuối năm 2008 thế giới có khoảng 33 triệu người nhiễm virus HIV. Hàng năm có khoảng 2 triệu người chết vì căn bệnh AIDS, gần 3 triệu người nhiễm mới, nhưng chỉ có 40% biết mình nhiễm HIV./.
Tân Hoa xã
|
|
|
|
|
|
Danh hiệu: Thành viên gắn bóNhóm: Thành viên chính thức
Gia nhập: 03-10-2005(UTC)
Bài viết: 94
Cảm ơn: 1 lần
Được cảm ơn: 5 lần trong 3 bài viết
|
| New Israeli treatment kills HIV cells |
 |
By By ISRAEL21c Staff
September 08, 2010
A new treatment that destroys HIV-infected human cells without damaging healthy ones has been developed by a team of Israeli researchers.
Researchers at Hebrew University of Jerusalem may have made a major step forward in the race against AIDS.
The therapy, developed by scientists from the university's Alexander Silberman Institute of Life Sciences and the Institute of Chemistry, destroys cells infected with HIV without damaging adjacent healthy cells. It is described in an article published last month in the scientific journal AIDS Research and Therapy.
To date, no therapy has succeeded in completely destroying HIV-infected cells. Current treatments only delay the development of the disease and make it more manageable. If treatment is halted, however, or the virus develops immunity to the cocktail of drugs now used, it can begin infecting new cells.
The new treatment fights HIV by causing infected cells to self-destruct. When the AIDS virus infects a cell, its DNA penetrates the cell, which then manufactures new HIV viruses that infect neighboring cells.
Triggering the cell to self-destruct
Dr. Abraham Loyter of HUJ explains that with the treatment peptides, or segments of short proteins that the scientists developed, interfere with the HIV virus's replication of its genetic material, by transmitting a massive number of replications of the genetic material into the infected cell, triggering its self-destruction.
"The usual medications kill the virus that has entered the body during infection, and the [peptide] treatment allows cells infected with the genetic load of the virus to be killed," Loyter said in an article inIsrael's Ha'aretz newspaper.
The study by Loyter, Prof. Assaf Friedler, Dr. Aviad Levin, and Dr. Zvi Hayouka, examined the effectiveness of the new treatment on the HIV-1 virus, which is the predominant cause of AIDS in developing nations.
When the treatment, which was patented earlier this year, was applied to human cell cultures, the infected human cells disappeared in two weeks, and did not reappear up to two weeks later.
Animal and clinical trials ahead
Yissum, the HU technology transfer body, is seeking a commercial partner to continue developing the treatment through animal and clinical trials.
An estimated 33.4 million people worldwide are carriers of HIV, while in the US alone, it is estimated that more than one million people are living with HIV, while another half a million have died of AIDS. In Israel, in 2008, 390 new cases were reported, the highest figure in a decade.
The current breakthrough joins other new therapies being developed to fight AIDS, such as a US-funded study in Thailand of an AIDS vaccination, and a vaginal gel developed in South Africa that prevents replication of the virus and reduces the risk of infection by 54 percent.
|
|
|
|
|
|
Danh hiệu: Thành viên gắn bóNhóm: Thành viên chính thức
Gia nhập: 03-10-2005(UTC)
Bài viết: 94
Cảm ơn: 1 lần
Được cảm ơn: 5 lần trong 3 bài viết
|
Short report
Specific eradication of HIV-1 from infected cultured cells
Aviad Levin1  , Zvi Hayouka2 , Assaf Friedler2 and Abraham Loyter1 
1 Department of Biological Chemistry, The Alexander Silberman Institute of Life Sciences; The Hebrew University of Jerusalem, Safra Campus, Givat Ram, Jerusalem 91904, Israel
2 Institute of Chemistry; The Hebrew University of Jerusalem, Safra Campus, Givat Ram, Jerusalem 91904, Israel
 author email corresponding author email
AIDS Research and Therapy 2010, 7:31doi:10.1186/1742-6405-7-31
The electronic version of this article is the complete one and can be found online at:http://www.aidsrestherapy.com/content/7/1/31
| Received: |
7 May 2010 |
| Accepted: |
19 August 2010 |
| Published: |
19 August 2010 |
© 2010 Levin et al; licensee BioMed Central Ltd.
This is an Open Access article distributed under the terms of the Creative Commons Attribution License (http://creativecommons.org/licenses/by/2.0), which permits unrestricted use, distribution, and reproduction in any medium, provided the original work is properly cited.
Abstract
A correlation between increase in the integration of Human Immunodeficiency virus-1 (HIV-1) cDNA and cell death was previously established. Here we show that combination of peptides that stimulate integration together with the protease inhibitor Ro 31-8959 caused apoptotic cell death of HIV infected cells with total extermination of the virus. This combination did not have any effect on non-infected cells. Thus it appears that cell death is promoted only in the infected cells. It is our view that the results described in this work suggest a novel approach to specifically promote death of HIV-1 infected cells and thus may eventually be developed into a new and general anti-viral therapy.
Findings
No cure or vaccine are currently available for the human immunodeficiency virus type 1 (HIV-1) infection as well as for the resulting Acquired Immunodeficiency syndrome (AIDS) [1]. However, an highly active antiretroviral therapy (HAART), which blocks the activities of the viral reverse transcriptase and protease and inhibits the virus-host fusion process, is presently used [2,3]. The HAART transforms the infection process into a chronic disease [4-6]. Furthermore, the risk of infection can significantly be reduced if the HAART treatment is given right after exposure to the virus [7].
New therapeutic approaches and new anti-viral inhibitors are being continuously developed to obtain a better restriction of the HIV-1 infection process [8-19]. However, once the viral cDNA is integrated into the host chromosome it is almost impossible to terminate infection process and cure AIDS. A way to eradicate the integrated viral cDNA from virus infected cells by stimulating the viral Integrase (IN) mediated disintegration process was suggested recently [20,21]. However, this approach is only in its initial steps [20].
HIV-1 infected cells, unlike cells infected by other retroviruses, bear only 1-2 copies of integrated viral cDNA/cell [22,23]. This is in spite of the presence of numerous copies of unintegrated viral cDNA [22,24]. Recently we have shown that this restriction is due to inhibition of the viral IN activity as well as of its nuclear import by an early expressed viral Rev protein following Rev-IN interaction [25-30]. Disruption of the Rev-IN complex by IN-derived cell permeable peptides, such as the INS [31] and INrs [28], results in multi-integration of the viral cDNA [26,28,31]. Previous findings have shown that multi-integration of viral DNA in AIDS patients may lead to host genome instability[32]. Indeed, a correlation between promotion of multi-integration and increase in cell death was demonstrated recently by us [25].
Based on these observations we have developed a novel approach to specifically and significantly eradicate HIV-1 infected cells as well as to eliminate infectious virions from cultured cells. As can be seen in Fig. 1a, addition of the integration-stimulating INS or INr peptides or combination of both (150 μM each) to cells infected by wild type (WT) HIV-1 significantly increased the appearance of new virions during the first 6-8 days post infection (PI). However, from the eighth day PI, a decrease in virus production can be observed. The results in Fig.1b show that the degree of the reduction is directly correlated to the MOI (multiplicity of infection) of the infected HIV-1. Almost complete eradication of virions was obtained when cells were infected, in the presence of the INS and the INr peptides, by relatively high titer of the virus (Fig. 1b). This eradication (Fig. 1a and 1b) is probably due to promotion of cell death (Fig. 1c), which in turn may result from the peptides induced stimulation of the integration process (Fig. 1dI and see [28]). Our results indicate that at very long periods PI a complete eradication of virus particles is obtained (Fig. 1).
 Figure 1. Specific killing of HIV-1 infected cells. (a) H9 lymphocyte T cells were infected by the WT HIV-1 at MOI of 0.1, exactly as described in [28], and then the infected cells were treated every two days with the indicated molecules or combinations. Every two days a sample was removed and its virus titer was estimated by the MAGI assay [37] using TZM-bl cells exactly as described [28]. (b) H9 lymphocyte T cells were infected with WT HIV-1 at the indicated MOIs and treated with INS or INS+INrs. The amount of virus production was estimated using MAGI assay on TZM-bl cells at 48 h PI. (c) Same as (a) but cells viability was estimated by the MTT assay as described in [28]. (dI) and (dII) Same as (a) but the average amount of viral cDNA integration events/cells was estimated by quantitative hemi-nested Real Time PCR exactly as described in [28]. Cells were grown as described in [28]. Viruses were produced and viral stock titer was estimated as described in [29]. Peptides were synthesized and purified as described in [28,31]. The following concentrations were used: AZT 2 μM, Ro 31-8959 10 nM, INS/INrs 150 μM. Every experiment was preformed at least three times with relative error not more ±10%. Error bars represent standard deviation.
When the specific HIV-1 protease inhibitor (Ro 31-8959 [33]) was added to virus infected cells together with either the INS or the INrs peptides or with both (the mixture of the INS, INrs and Ro 31-8959 was designated as Mix, see Fig. 1) the increase in virus production (Fig. 1a) and in viral cDNA integration (Fig. 1dII) was observed only during the first 2-4 days PI. On the other hand a drastic reduction in both virus production and cDNA integration could be observed from the fourth day PI and on, reaching below the detection levels in the presence of the Mix (Fig. 1a and 1dII). As can be seen (Fig. 1c) about 40% of the cultured cells died by the eighth day PI following the addition of the Mix. This percentage may represent the relative amount of virus infected cells, probably indicating total death of these cells. Furthermore, our results (Fig. 1a and 1dII) clearly show that at this time (8 days PI) the large majority of the virus was cleared from the culture. Therefore it is conceivable that the increase in the percentage of viable cells observed between 8-12 days PI (Fig. 1c) is due to division of uninfected cells.
To determine whether the above treatment (combination of INS + INrs and Ro 31-8959) indeed results in eradication of the infected virions and termination of the infection process, the following experiment was conducted: the cultured cells were infected by the WT HIV at MOI of 1 and 24 h PI cells were treated, every two days, with Ro 31-8959, INS+Ro 31-8959, INrs+Ro 31-8959 or by the Mix for the total duration of two weeks. Following this period the treated cells were left to grow, untreated, for two additional weeks.
At the end of each of those periods namely: pre treatment, after two weeks of treatment and two weeks post termination of treatment (four weeks PI), the average amounts of viral RNA copies/cell (Fig. 2a), total viral DNA copies/cells (Fig. 2b) and of integrated viral cDNA/cell (Fig. 2c) as well as the amounts of viral p24 protein (Fig. 2d) and appearance of new virions (Fig. 2e) were estimated.
 Figure 2. Eradication of HIV-1 infection. H9 lymphocyte T cells were infected with the WT HIV-1 at MOI of 1, exactly as described in [28]. Starting at 24 h PI the infected cells were treated every two days with the indicated molecules for two weeks. At the end of the two weeks treatment, cells were left to grow untreated. (a) The average amount of viral RNA copies per cell was estimated as described in [38]: prior to treatment, at the end of the two weeks treatments and two weeks post the termination of the treatment (four weeks PI). (b) Same as in(a) but the average amount of viral DNA copies per cell was estimated as described in [29,39]. (c) Same as in(a) but the average amount of integration events per cells was estimated as described in [28]. (d) Same as in(a) but the average amount of viral p24 was estimated as described in [30](e) The amount of infectious virus produced by the cells was estimated, as described in [28]. All other conditions ad described in Fig. 1.
As can be seen a substantial reduction in virus production and integration was observed following the first two weeks treatment (Fig. 2), However, when treatment with the various combinations of peptides and the protease inhibitor was terminated, virus production and integration were restored except in cells treated with the Mix, indicating a Mix induced complete eradication of infection (Fig. 2).
It appears that the INS and INrs induced cells death is mostly by a caspase 3-dependent apoptosis pathway. This can be inferred from the western blot analysis which shows the appearance of active caspase 3 (apoptosis marker [34]) (Fig. 3). On the other hand, no autophagy cell death or necrosis could be observed following western blot analysis using the anti apg16 (autophagy marker [35]) or TNFα  necrosis marker [36]) respectively (Fig. 3). As expected--and also observed in Fig. 2d--a western blot analysis also show that there is reduction in the production of p24 in cells treated by the protease inhibitor Ro 31-8959 (Fig. 3). In addition both INS and INrs peptides which stimulate integration and infection also stimulated production of p24 (Fig. 3 and see also [28,31]). This increase in infection is in direct correlation to apoptotic cell death (Fig. 3 and see also [28,31]). On the other hand, when Ro 31-8959 was added together with INS, INrs or both, a significant decrease in p24 as well as increase in apoptotic cell death could be observed (Fig. 3).
 Figure 3. Correlation between cell death and treatment. H9 lymphocyte T cells were infected with the WT HIV-1 at MOI of 1, exactly as described in [28]. Starting at 24 h PI the infected cells were treated every two days with the indicated molecules for two weeks. Following the two weeks of treatment cells were lysed as described in [25,29] and the laysets were subjected to western blot analysis for actin as described in [25,29] for the cell death markers (Apg16 marker for autophagy [35], TNF α marker for necrosis [36] and active caspase 3 marker for apoptosis [34]) as described in [40] and for the viral p24 as described in [41].
It should be noted that the possibility in which a low number integrated viral DNA is still be present at a latent state cannot be totally excluded. Further experiments are presently being conducted in our laboratory in order to study reactivation of those few-- if any--latent proviruses.
We conclude that stimulation of viral integration by the INS and INrs peptides, combined with the prevention of virion production by the protease inhibitor, not only resulted in blocking of HIV-1 infection but also in extermination of the infected cells by invoking apoptosis. This treatment has cleared the cell culture from cells bearing the integrated proviruses. It should be added however that the novel approach described here for AIDS therapy is only in its initial steps and further attempts to improve the activity of the stimulating peptides are currently conducted in our laboratory.
Competing interests
The authors declare that they have no competing interests.
Authors' contributions
A. Levin designed and performed the experiments, analyzed data and contributed to writing the paper; ZH performed peptide synthesis and purification; AF designed the study, and contributed to the writing; A. Loyter designed the study, contributed to the writing of the paper and coordinated the study. All authors have read and approved the manuscript.
Acknowledgements
This work was supported by the Israeli Science Foundation (A. Loyter) and by a starting grant from the European Research Council (ERC) (to AF). Cells and WT HIV-1 virus were provided by the NIH Reagent Program, Division of AIDS, NIAID, NIH (Bethesda, MD, USA).
References
-
Robb ML: Failure of the Merck HIV vaccine: an uncertain step forward.
Lancet 2008 , 372:1857-1858. PubMed Abstract | Publisher Full Text 
-
Gulick RM, Mellors JW, Havlir D, Eron JJ, Gonzalez C, McMahon D, Richman DD, Valentine FT, Jonas L, Meibohm A, et al.: Treatment with indinavir, zidovudine, and lamivudine in adults with human immunodeficiency virus infection and prior antiretroviral therapy.
N Engl J Med 1997 , 337:734-739. PubMed Abstract | Publisher Full Text
-
Lalezari JP, Henry K, O'Hearn M, Montaner JS, Piliero PJ, Trottier B, Walmsley S, Cohen C, Kuritzkes DR, Eron JJ Jr, et al.:Enfuvirtide, an HIV-1 fusion inhibitor, for drug-resistant HIV infection in North and South America.
N Engl J Med 2003 , 348:2175-2185. PubMed Abstract | Publisher Full Text
-
Chene G, Sterne JA, May M, Costagliola D, Ledergerber B, Phillips AN, Dabis F, Lundgren J, D'Arminio Monforte A, de Wolf F, et al.:Prognostic importance of initial response in HIV-1 infected patients starting potent antiretroviral therapy: analysis of prospective studies.
Lancet 2003 , 362:679-686. PubMed Abstract | Publisher Full Text
-
Palella FJ Jr, Delaney KM, Moorman AC, Loveless MO, Fuhrer J, Satten GA, Aschman DJ, Holmberg SD: Declining morbidity and mortality among patients with advanced human immunodeficiency virus infection. HIV Outpatient Study Investigators.
N Engl J Med 1998 , 338:853-860. PubMed Abstract | Publisher Full Text
-
Wood E, Hogg RS, Yip B, Harrigan PR, O'Shaughnessy MV, Montaner JS: Is there a baseline CD4 cell count that precludes a survival response to modern antiretroviral therapy?
AIDS 2003 , 17:711-720. PubMed Abstract | Publisher Full Text
-
Fan H, Conner RF, Villarreal LP: AIDS: science and society. 4th edition. Jones and Bartlett Publishers; 2005.
-
Chiu YL, Soros VB, Kreisberg JF, Stopak K, Yonemoto W, Greene WC: Cellular APOBEC3G restricts HIV-1 infection in resting CD4+ T cells.
Nature 2005 , 435:108-114. PubMed Abstract | Publisher Full Text
-
Donzella GA, Schols D, Lin SW, Este JA, Nagashima KA, Maddon PJ, Allaway GP, Sakmar TP, Henson G, De Clercq E, Moore JP:AMD3100, a small molecule inhibitor of HIV-1 entry via the CXCR4 co-receptor.
Nat Med 1998 , 4:72-77. PubMed Abstract | Publisher Full Text
-
Hauber I, Bevec D, Heukeshoven J, Kratzer F, Horn F, Choidas A, Harrer T, Hauber J: Identification of cellular deoxyhypusine synthase as a novel target for antiretroviral therapy.
J Clin Invest 2005 , 115:76-85. PubMed Abstract | PubMed Central Full Text
-
Hazuda DJ, Young SD, Guare JP, Anthony NJ, Gomez RP, Wai JS, Vacca JP, Handt L, Motzel SL, Klein HJ, et al.: Integrase inhibitors and cellular immunity suppress retroviral replication in rhesus macaques.
Science 2004 , 305:528-532. PubMed Abstract | Publisher Full Text
-
Huthoff H, Malim MH: Cytidine deamination and resistance to retroviral infection: towards a structural understanding of the APOBEC proteins.
Virology 2005 , 334:147-153. PubMed Abstract | Publisher Full Text
-
Perros M: CCR5 antagonists for the treatment of HIV infection and AIDS.
In Advances in Antiviral Drug Design Edited by: De Clercq E. 2007 , 5:185-212. Publisher Full Text
-
De Clercq E: The history of antiretrovirals: key discoveries over the past 25 years.
Rev Med Virol 2009 , 19:287-299. PubMed Abstract | Publisher Full Text
-
Pommier Y, Johnson AA, Marchand C: Integrase inhibitors to treat HIV/AIDS.
Nat Rev Drug Discov 2005 , 4:236-248. PubMed Abstract | Publisher Full Text
-
Cane PA: New developments in HIV drug resistance.
J Antimicrob Chemother 2009 , 64(Suppl 1):i37-40. PubMed Abstract | Publisher Full Text
-
De Clercq E: The acyclic nucleoside phosphonates from inception to clinical use: historical perspective.
Antiviral Res 2007 , 75:1-13. PubMed Abstract | Publisher Full Text
-
DeJesus E, Berger D, Markowitz M, Cohen C, Hawkins T, Ruane P, Elion R, Farthing C, Zhong L, Cheng AK, et al.: Antiviral activity, pharmacokinetics, and dose response of the HIV-1 integrase inhibitor GS-9137 (JTK-303) in treatment-naive and treatment-experienced patients.
J Acquir Immune Defic Syndr 2006 , 43:1-5. PubMed Abstract | Publisher Full Text
-
Steigbigel RT, Cooper DA, Kumar PN, Eron JE, Schechter M, Markowitz M, Loutfy MR, Lennox JL, Gatell JM, Rockstroh JK, et al.:Raltegravir with optimized background therapy for resistant HIV-1 infection.
N Engl J Med 2008 , 359:339-354. PubMed Abstract | Publisher Full Text
-
Engelman A: AIDS/HIV. A reversal of fortune in HIV-1 integration.
Science 2007 , 316:1855-1857. PubMed Abstract | Publisher Full Text
-
Sarkar I, Hauber I, Hauber J, Buchholz F: HIV-1 proviral DNA excision using an evolved recombinase.
Science 2007 , 316:1912-1915. PubMed Abstract | Publisher Full Text
-
Butler SL, Hansen MS, Bushman FD: A quantitative assay for HIV DNA integration in vivo.
Nat Med 2001 , 7:631-634. PubMed Abstract | Publisher Full Text
-
Gelderblom HC, Vatakis DN, Burke SA, Lawrie SD, Bristol GC, Levy DN: Viral complementation allows HIV-1 replication without integration.
Retrovirology 2008 , 5:60. PubMed Abstract | BioMed Central Full Text | PubMed Central Full Text
-
Chun TW, Carruth L, Finzi D, Shen X, DiGiuseppe JA, Taylor H, Hermankova M, Chadwick K, Margolick J, Quinn TC, et al.:Quantification of latent tissue reservoirs and total body viral load in HIV-1 infection.
Nature 1997 , 387:183-188. PubMed Abstract | Publisher Full Text
-
Levin A, Hayouka Z, Brack-Werner R, Volsky DJ, Friedler A, Loyter A: Novel regulation of HIV-1 replication and pathogenicity: Rev inhibition of integration.
Protein Eng Des Sel 2009 , 22:753-763. PubMed Abstract | Publisher Full Text
-
Levin A, Hayouka Z, Friedler A, Brack-Werner R, Volsky DJ, Loyter A: A novel role for the viral Rev protein in promoting resistance to Super-infection by Human Immunodeficiency Virus type 1.
J Gen Virol 2010 , 91:1503-1513. PubMed Abstract | Publisher Full Text
-
Levin A, Hayouka Z, Friedler A, Loyter A: Nucleocytoplasmic shuttling of HIV-1 integrase is controlled by the viral Rev protein.[http://www.landesbioscience.com/journals/nucleus/article/11300/] webcite
Nucleus 2010. , 1:PubMed Abstract | PubMed Central Full Text
-
Levin A, Hayouka Z, Helfer M, Brack-Werner R, Friedler A, Loyter A: Peptides derived from HIV-1 integrase that bind Rev stimulate viral genome integration.
PLoS ONE 2009 , 4:e4155. PubMed Abstract | Publisher Full Text | PubMed Central Full Text
-
Levin A, Rosenbluh J, Hayouka Z, Friedler A, Loyter A: Integration of HIV-1 DNA is regulated by interplay between viral Rev and cellular LEDGF/p75 proteins.
Mol Med 2010 , 16:34-44. PubMed Abstract | Publisher Full Text | PubMed Central Full Text
-
Rosenbluh J, Hayouka Z, Loya S, Levin A, Armon-Omer A, Britan E, Hizi A, Kotler M, Friedler A, Loyter A: Interaction between HIV-1 Rev and integrase proteins: a basis for the development of anti-HIV peptides.
J Biol Chem 2007 , 282:15743-15753. PubMed Abstract | Publisher Full Text
-
Levin A, Hayouka Z, Helfer M, Brack-Werner R, Friedler A, Loyter A: Stimulation of the HIV-1 Integrase Enzymatic Activity and cDNA Integration by a Peptide Derived from the Integrase Protein.
Biopolymers 2010 , 93:740-751. PubMed Abstract | Publisher Full Text
-
Jung A, Maier R, Vartanian JP, Bocharov G, Jung V, Fischer U, Meese E, Wain-Hobson S, Meyerhans A: Multiply infected spleen cells in HIV patients.
Nature 2002 , 418:144. PubMed Abstract | Publisher Full Text
-
Roberts NA, Craig JC, Duncan IB: HIV proteinase inhibitors.
Biochem Soc Trans 1992 , 20:513-516. PubMed Abstract
-
Sarojini H, Medepalli K, Terry DA, Alphenaar BW, Wang E: Localized delivery of DNA to the cells by viral collagen-loaded silica colloidal crystals.
Biotechniques 2007 , 43:213-214. PubMed Abstract | Publisher Full Text
216-218, 220-211
-
Mizushima N, Kuma A, Kobayashi Y, Yamamoto A, Matsubae M, Takao T, Natsume T, Ohsumi Y, Yoshimori T: Mouse Apg16L, a novel WD-repeat protein, targets to the autophagic isolation membrane with the Apg12-Apg5 conjugate.
J Cell Sci 2003 , 116:1679-1688. PubMed Abstract | Publisher Full Text
-
Cavin LG, Venkatraman M, Factor VM, Kaur S, Schroeder I, Mercurio F, Beg AA, Thorgeirsson SS, Arsura M: Regulation of alpha-fetoprotein by nuclear factor-kappaB protects hepatocytes from tumor necrosis factor-alpha cytotoxicity during fetal liver development and hepatic oncogenesis.
Cancer Res 2004 , 64:7030-7038. PubMed Abstract | Publisher Full Text
-
Kimpton J, Emerman M: Detection of replication-competent and pseudotyped human immunodeficiency virus with a sensitive cell line on the basis of activation of an integrated beta-galactosidase gene.
J Virol 1992 , 66:2232-2239. PubMed Abstract | PubMed Central Full Text
-
Pizzato M, Erlwein O, Bonsall D, Kaye S, Muir D, McClure MO: A one-step SYBR Green I-based product-enhanced reverse transcriptase assay for the quantitation of retroviruses in cell culture supernatants.
J Virol Methods 2009 , 156:1-7. PubMed Abstract | Publisher Full Text
-
Casabianca A, Gori C, Orlandi C, Forbici F, Federico Perno C, Magnani M: Fast and sensitive quantitative detection of HIV DNA in whole blood leucocytes by SYBR green I real-time PCR assay.
Mol Cell Probes 2007 , 21:368-378. PubMed Abstract | Publisher Full Text
-
Levin A, Hayouka Z, Friedler A, Loyter A: Over expression of the HIV-1 Rev promotes death of non-dividing eukaryotic cells.
Virus Genes 2010 , 40:341-346. PubMed Abstract | Publisher Full Text
-
Aquaro S, Muscoli C, Ranazzi A, Pollicita M, Granato T, Masuelli L, Modesti A, Perno CF, Mollace V: The contribution of peroxynitrite generation in HIV replication in human primary macrophages.
Retrovirology 2007 , 4:76. PubMed Abstract | BioMed Central Full Text | PubMed Central Full Text
|
|
|
|
|
|
 Danh hiệu: Thành viên danh dựMedals:   Nhóm: Administrators, Thành viên chính thức, BQT, Tham vấn viên Diễn đàn
Gia nhập: 06-03-2006(UTC)
Bài viết: 1.459
Đến từ: TPHCM
Cảm ơn: 74 lần
Được cảm ơn: 511 lần trong 232 bài viết
|
@demlaoxao: bạn có hiểu hết những gì bạn chia sẻ ở trên không? 
|
|
|
|
|
|
Danh hiệu: Thành viên gắn bóNhóm: Thành viên chính thức
Gia nhập: 23-10-2006(UTC)
Bài viết: 578
Đến từ: SG
Cảm ơn: 2 lần
Được cảm ơn: 17 lần trong 12 bài viết
|
Israeli scientists find new HIV treatment
English.news.cn 2010-09-05 21:54:16 FeedbackPrintRSS
JERUSALEM, Sept. 5 (Xinhua) -- Israeli medical researchers in Jerusalem have recently developed a new treatment for HIV infections which may lead to a breakthrough in treating the AIDS virus.
The new treatment wipes out infected cells without affecting neighboring healthy ones, according to a report in the latest edition of the peer-reviewed British journal "AIDS Research and Therapy."
Peptides, unique short protein segments developed by the researchers, can interfere with replication and, at the same time, overwhelm the infected cell, triggering its self-destruction, local Ha'aretz newspaper reported.
"It is our view that the results described in this work suggest a novel approach to specifically promote death of HIV-1 infected cells and thus may eventually be developed into a new and general anti-viral therapy," the researchers said in the British journal.
"The usual medications kill the virus that has entered the body during infection and the (peptide) treatment allows cells infected with the genetic load of the virus to be killed," they added.
Although the researchers have registered an Israeli patent, the treatment must still go through animals and humans trials, Ha' aretz said.
Editor: Lu Hui | Đối với thế giới, bạn chỉ là một người;
Nhưng đối với một người, bạn là cả thế giới... |
|
|
|
|
|
 Danh hiệu: MemberNhóm:
Gia nhập: 12-09-2010(UTC)
Bài viết: 19
Đến từ: sai gon
Cảm ơn: 2 lần
Được cảm ơn: 3 lần trong 3 bài viết
|
Đề nghị cho thêm phiên bản tiếng A rập đọc cho dễ hiểu. 
|
|
|
|
|
|
Danh hiệu: Thành viên danh dựMedals: Nhóm: Administrators, Thành viên chính thức, BQT, Tham vấn viên Diễn đàn
Gia nhập: 06-03-2006(UTC)
Bài viết: 1.459
Đến từ: TPHCM
Cảm ơn: 74 lần
Được cảm ơn: 511 lần trong 232 bài viết
|
Demlaoxao đã viết:
Short report
Specific eradication of HIV-1 from infected cultured cells
Aviad Levin1 , Zvi Hayouka2 , Assaf Friedler2 and Abraham Loyter1
1 Department of Biological Chemistry, The Alexander Silberman Institute of Life Sciences; The Hebrew University of Jerusalem, Safra Campus, Givat Ram, Jerusalem 91904, Israel
2 Institute of Chemistry; The Hebrew University of Jerusalem, Safra Campus, Givat Ram, Jerusalem 91904, Israel
author email corresponding author email
AIDS Research and Therapy 2010, 7:31doi:10.1186/1742-6405-7-31
The electronic version of this article is the complete one and can be found online at:http://www.aidsrestherapy.com/content/7/1/31
| Received: |
7 May 2010 |
| Accepted: |
19 August 2010 |
| Published: |
19 August 2010 |
© 2010 Levin et al; licensee BioMed Central Ltd.
This is an Open Access article distributed under the terms of the Creative Commons Attribution License (http://creativecommons.org/licenses/by/2.0), which permits unrestricted use, distribution, and reproduction in any medium, provided the original work is properly cited.
Abstract
A correlation between increase in the integration of Human Immunodeficiency virus-1 (HIV-1) cDNA and cell death was previously established. Here we show that combination of peptides that stimulate integration together with the protease inhibitor Ro 31-8959 caused apoptotic cell death of HIV infected cells with total extermination of the virus. This combination did not have any effect on non-infected cells. Thus it appears that cell death is promoted only in the infected cells. It is our view that the results described in this work suggest a novel approach to specifically promote death of HIV-1 infected cells and thus may eventually be developed into a new and general anti-viral therapy.
Findings
No cure or vaccine are currently available for the human immunodeficiency virus type 1 (HIV-1) infection as well as for the resulting Acquired Immunodeficiency syndrome (AIDS) [1]. However, an highly active antiretroviral therapy (HAART), which blocks the activities of the viral reverse transcriptase and protease and inhibits the virus-host fusion process, is presently used [2,3]. The HAART transforms the infection process into a chronic disease [4-6]. Furthermore, the risk of infection can significantly be reduced if the HAART treatment is given right after exposure to the virus [7].
New therapeutic approaches and new anti-viral inhibitors are being continuously developed to obtain a better restriction of the HIV-1 infection process [8-19]. However, once the viral cDNA is integrated into the host chromosome it is almost impossible to terminate infection process and cure AIDS. A way to eradicate the integrated viral cDNA from virus infected cells by stimulating the viral Integrase (IN) mediated disintegration process was suggested recently [20,21]. However, this approach is only in its initial steps [20].
HIV-1 infected cells, unlike cells infected by other retroviruses, bear only 1-2 copies of integrated viral cDNA/cell [22,23]. This is in spite of the presence of numerous copies of unintegrated viral cDNA [22,24]. Recently we have shown that this restriction is due to inhibition of the viral IN activity as well as of its nuclear import by an early expressed viral Rev protein following Rev-IN interaction [25-30]. Disruption of the Rev-IN complex by IN-derived cell permeable peptides, such as the INS [31] and INrs [28], results in multi-integration of the viral cDNA [26,28,31]. Previous findings have shown that multi-integration of viral DNA in AIDS patients may lead to host genome instability[32]. Indeed, a correlation between promotion of multi-integration and increase in cell death was demonstrated recently by us [25].
Based on these observations we have developed a novel approach to specifically and significantly eradicate HIV-1 infected cells as well as to eliminate infectious virions from cultured cells. As can be seen in Fig. 1a, addition of the integration-stimulating INS or INr peptides or combination of both (150 μM each) to cells infected by wild type (WT) HIV-1 significantly increased the appearance of new virions during the first 6-8 days post infection (PI). However, from the eighth day PI, a decrease in virus production can be observed. The results in Fig.1b show that the degree of the reduction is directly correlated to the MOI (multiplicity of infection) of the infected HIV-1. Almost complete eradication of virions was obtained when cells were infected, in the presence of the INS and the INr peptides, by relatively high titer of the virus (Fig. 1b). This eradication (Fig. 1a and 1b) is probably due to promotion of cell death (Fig. 1c), which in turn may result from the peptides induced stimulation of the integration process (Fig. 1dI and see [28]). Our results indicate that at very long periods PI a complete eradication of virus particles is obtained (Fig. 1).
Figure 1. Specific killing of HIV-1 infected cells. (a) H9 lymphocyte T cells were infected by the WT HIV-1 at MOI of 0.1, exactly as described in [28], and then the infected cells were treated every two days with the indicated molecules or combinations. Every two days a sample was removed and its virus titer was estimated by the MAGI assay [37] using TZM-bl cells exactly as described [28]. (b) H9 lymphocyte T cells were infected with WT HIV-1 at the indicated MOIs and treated with INS or INS+INrs. The amount of virus production was estimated using MAGI assay on TZM-bl cells at 48 h PI. (c) Same as (a) but cells viability was estimated by the MTT assay as described in [28]. (dI) and (dII) Same as (a) but the average amount of viral cDNA integration events/cells was estimated by quantitative hemi-nested Real Time PCR exactly as described in [28]. Cells were grown as described in [28]. Viruses were produced and viral stock titer was estimated as described in [29]. Peptides were synthesized and purified as described in [28,31]. The following concentrations were used: AZT 2 μM, Ro 31-8959 10 nM, INS/INrs 150 μM. Every experiment was preformed at least three times with relative error not more ±10%. Error bars represent standard deviation.
When the specific HIV-1 protease inhibitor (Ro 31-8959 [33]) was added to virus infected cells together with either the INS or the INrs peptides or with both (the mixture of the INS, INrs and Ro 31-8959 was designated as Mix, see Fig. 1) the increase in virus production (Fig. 1a) and in viral cDNA integration (Fig. 1dII) was observed only during the first 2-4 days PI. On the other hand a drastic reduction in both virus production and cDNA integration could be observed from the fourth day PI and on, reaching below the detection levels in the presence of the Mix (Fig. 1a and 1dII). As can be seen (Fig. 1c) about 40% of the cultured cells died by the eighth day PI following the addition of the Mix. This percentage may represent the relative amount of virus infected cells, probably indicating total death of these cells. Furthermore, our results (Fig. 1a and 1dII) clearly show that at this time (8 days PI) the large majority of the virus was cleared from the culture. Therefore it is conceivable that the increase in the percentage of viable cells observed between 8-12 days PI (Fig. 1c) is due to division of uninfected cells.
To determine whether the above treatment (combination of INS + INrs and Ro 31-8959) indeed results in eradication of the infected virions and termination of the infection process, the following experiment was conducted: the cultured cells were infected by the WT HIV at MOI of 1 and 24 h PI cells were treated, every two days, with Ro 31-8959, INS+Ro 31-8959, INrs+Ro 31-8959 or by the Mix for the total duration of two weeks. Following this period the treated cells were left to grow, untreated, for two additional weeks.
At the end of each of those periods namely: pre treatment, after two weeks of treatment and two weeks post termination of treatment (four weeks PI), the average amounts of viral RNA copies/cell (Fig. 2a), total viral DNA copies/cells (Fig. 2b) and of integrated viral cDNA/cell (Fig. 2c) as well as the amounts of viral p24 protein (Fig. 2d) and appearance of new virions (Fig. 2e) were estimated.
Figure 2. Eradication of HIV-1 infection. H9 lymphocyte T cells were infected with the WT HIV-1 at MOI of 1, exactly as described in [28]. Starting at 24 h PI the infected cells were treated every two days with the indicated molecules for two weeks. At the end of the two weeks treatment, cells were left to grow untreated. (a) The average amount of viral RNA copies per cell was estimated as described in [38]: prior to treatment, at the end of the two weeks treatments and two weeks post the termination of the treatment (four weeks PI). (b) Same as in(a) but the average amount of viral DNA copies per cell was estimated as described in [29,39]. (c) Same as in(a) but the average amount of integration events per cells was estimated as described in [28]. (d) Same as in(a) but the average amount of viral p24 was estimated as described in [30](e) The amount of infectious virus produced by the cells was estimated, as described in [28]. All other conditions ad described in Fig. 1.
As can be seen a substantial reduction in virus production and integration was observed following the first two weeks treatment (Fig. 2), However, when treatment with the various combinations of peptides and the protease inhibitor was terminated, virus production and integration were restored except in cells treated with the Mix, indicating a Mix induced complete eradication of infection (Fig. 2).
It appears that the INS and INrs induced cells death is mostly by a caspase 3-dependent apoptosis pathway. This can be inferred from the western blot analysis which shows the appearance of active caspase 3 (apoptosis marker [34]) (Fig. 3). On the other hand, no autophagy cell death or necrosis could be observed following western blot analysis using the anti apg16 (autophagy marker [35]) or TNFα necrosis marker [36]) respectively (Fig. 3). As expected--and also observed in Fig. 2d--a western blot analysis also show that there is reduction in the production of p24 in cells treated by the protease inhibitor Ro 31-8959 (Fig. 3). In addition both INS and INrs peptides which stimulate integration and infection also stimulated production of p24 (Fig. 3 and see also [28,31]). This increase in infection is in direct correlation to apoptotic cell death (Fig. 3 and see also [28,31]). On the other hand, when Ro 31-8959 was added together with INS, INrs or both, a significant decrease in p24 as well as increase in apoptotic cell death could be observed (Fig. 3).
Figure 3. Correlation between cell death and treatment. H9 lymphocyte T cells were infected with the WT HIV-1 at MOI of 1, exactly as described in [28]. Starting at 24 h PI the infected cells were treated every two days with the indicated molecules for two weeks. Following the two weeks of treatment cells were lysed as described in [25,29] and the laysets were subjected to western blot analysis for actin as described in [25,29] for the cell death markers (Apg16 marker for autophagy [35], TNF α marker for necrosis [36] and active caspase 3 marker for apoptosis [34]) as described in [40] and for the viral p24 as described in [41].
It should be noted that the possibility in which a low number integrated viral DNA is still be present at a latent state cannot be totally excluded. Further experiments are presently being conducted in our laboratory in order to study reactivation of those few-- if any--latent proviruses.
We conclude that stimulation of viral integration by the INS and INrs peptides, combined with the prevention of virion production by the protease inhibitor, not only resulted in blocking of HIV-1 infection but also in extermination of the infected cells by invoking apoptosis. This treatment has cleared the cell culture from cells bearing the integrated proviruses. It should be added however that the novel approach described here for AIDS therapy is only in its initial steps and further attempts to improve the activity of the stimulating peptides are currently conducted in our laboratory.
Competing interests
The authors declare that they have no competing interests.
Authors' contributions
A. Levin designed and performed the experiments, analyzed data and contributed to writing the paper; ZH performed peptide synthesis and purification; AF designed the study, and contributed to the writing; A. Loyter designed the study, contributed to the writing of the paper and coordinated the study. All authors have read and approved the manuscript.
Acknowledgements
This work was supported by the Israeli Science Foundation (A. Loyter) and by a starting grant from the European Research Council (ERC) (to AF). Cells and WT HIV-1 virus were provided by the NIH Reagent Program, Division of AIDS, NIAID, NIH (Bethesda, MD, USA).
References
-
Robb ML: Failure of the Merck HIV vaccine: an uncertain step forward.
Lancet 2008 , 372:1857-1858. PubMed Abstract | Publisher Full Text
-
Gulick RM, Mellors JW, Havlir D, Eron JJ, Gonzalez C, McMahon D, Richman DD, Valentine FT, Jonas L, Meibohm A, et al.: Treatment with indinavir, zidovudine, and lamivudine in adults with human immunodeficiency virus infection and prior antiretroviral therapy.
N Engl J Med 1997 , 337:734-739. PubMed Abstract | Publisher Full Text
-
Lalezari JP, Henry K, O'Hearn M, Montaner JS, Piliero PJ, Trottier B, Walmsley S, Cohen C, Kuritzkes DR, Eron JJ Jr, et al.:Enfuvirtide, an HIV-1 fusion inhibitor, for drug-resistant HIV infection in North and South America.
N Engl J Med 2003 , 348:2175-2185. PubMed Abstract | Publisher Full Text
-
Chene G, Sterne JA, May M, Costagliola D, Ledergerber B, Phillips AN, Dabis F, Lundgren J, D'Arminio Monforte A, de Wolf F, et al.:Prognostic importance of initial response in HIV-1 infected patients starting potent antiretroviral therapy: analysis of prospective studies.
Lancet 2003 , 362:679-686. PubMed Abstract | Publisher Full Text
-
Palella FJ Jr, Delaney KM, Moorman AC, Loveless MO, Fuhrer J, Satten GA, Aschman DJ, Holmberg SD: Declining morbidity and mortality among patients with advanced human immunodeficiency virus infection. HIV Outpatient Study Investigators.
N Engl J Med 1998 , 338:853-860. PubMed Abstract | Publisher Full Text
-
Wood E, Hogg RS, Yip B, Harrigan PR, O'Shaughnessy MV, Montaner JS: Is there a baseline CD4 cell count that precludes a survival response to modern antiretroviral therapy?
AIDS 2003 , 17:711-720. PubMed Abstract | Publisher Full Text
-
Fan H, Conner RF, Villarreal LP: AIDS: science and society. 4th edition. Jones and Bartlett Publishers; 2005.
-
Chiu YL, Soros VB, Kreisberg JF, Stopak K, Yonemoto W, Greene WC: Cellular APOBEC3G restricts HIV-1 infection in resting CD4+ T cells.
Nature 2005 , 435:108-114. PubMed Abstract | Publisher Full Text
-
Donzella GA, Schols D, Lin SW, Este JA, Nagashima KA, Maddon PJ, Allaway GP, Sakmar TP, Henson G, De Clercq E, Moore JP:AMD3100, a small molecule inhibitor of HIV-1 entry via the CXCR4 co-receptor.
Nat Med 1998 , 4:72-77. PubMed Abstract | Publisher Full Text
-
Hauber I, Bevec D, Heukeshoven J, Kratzer F, Horn F, Choidas A, Harrer T, Hauber J: Identification of cellular deoxyhypusine synthase as a novel target for antiretroviral therapy.
J Clin Invest 2005 , 115:76-85. PubMed Abstract | PubMed Central Full Text
-
Hazuda DJ, Young SD, Guare JP, Anthony NJ, Gomez RP, Wai JS, Vacca JP, Handt L, Motzel SL, Klein HJ, et al.: Integrase inhibitors and cellular immunity suppress retroviral replication in rhesus macaques.
Science 2004 , 305:528-532. PubMed Abstract | Publisher Full Text
-
Huthoff H, Malim MH: Cytidine deamination and resistance to retroviral infection: towards a structural understanding of the APOBEC proteins.
Virology 2005 , 334:147-153. PubMed Abstract | Publisher Full Text
-
Perros M: CCR5 antagonists for the treatment of HIV infection and AIDS.
In Advances in Antiviral Drug Design Edited by: De Clercq E. 2007 , 5:185-212. Publisher Full Text
-
De Clercq E: The history of antiretrovirals: key discoveries over the past 25 years.
Rev Med Virol 2009 , 19:287-299. PubMed Abstract | Publisher Full Text
-
Pommier Y, Johnson AA, Marchand C: Integrase inhibitors to treat HIV/AIDS.
Nat Rev Drug Discov 2005 , 4:236-248. PubMed Abstract | Publisher Full Text
-
Cane PA: New developments in HIV drug resistance.
J Antimicrob Chemother 2009 , 64(Suppl 1):i37-40. PubMed Abstract | Publisher Full Text
-
De Clercq E: The acyclic nucleoside phosphonates from inception to clinical use: historical perspective.
Antiviral Res 2007 , 75:1-13. PubMed Abstract | Publisher Full Text
-
DeJesus E, Berger D, Markowitz M, Cohen C, Hawkins T, Ruane P, Elion R, Farthing C, Zhong L, Cheng AK, et al.: Antiviral activity, pharmacokinetics, and dose response of the HIV-1 integrase inhibitor GS-9137 (JTK-303) in treatment-naive and treatment-experienced patients.
J Acquir Immune Defic Syndr 2006 , 43:1-5. PubMed Abstract | Publisher Full Text
-
Steigbigel RT, Cooper DA, Kumar PN, Eron JE, Schechter M, Markowitz M, Loutfy MR, Lennox JL, Gatell JM, Rockstroh JK, et al.:Raltegravir with optimized background therapy for resistant HIV-1 infection.
N Engl J Med 2008 , 359:339-354. PubMed Abstract | Publisher Full Text
-
Engelman A: AIDS/HIV. A reversal of fortune in HIV-1 integration.
Science 2007 , 316:1855-1857. PubMed Abstract | Publisher Full Text
-
Sarkar I, Hauber I, Hauber J, Buchholz F: HIV-1 proviral DNA excision using an evolved recombinase.
Science 2007 , 316:1912-1915. PubMed Abstract | Publisher Full Text
-
Butler SL, Hansen MS, Bushman FD: A quantitative assay for HIV DNA integration in vivo.
Nat Med 2001 , 7:631-634. PubMed Abstract | Publisher Full Text
-
Gelderblom HC, Vatakis DN, Burke SA, Lawrie SD, Bristol GC, Levy DN: Viral complementation allows HIV-1 replication without integration.
Retrovirology 2008 , 5:60. PubMed Abstract | BioMed Central Full Text | PubMed Central Full Text
-
Chun TW, Carruth L, Finzi D, Shen X, DiGiuseppe JA, Taylor H, Hermankova M, Chadwick K, Margolick J, Quinn TC, et al.:Quantification of latent tissue reservoirs and total body viral load in HIV-1 infection.
Nature 1997 , 387:183-188. PubMed Abstract | Publisher Full Text
-
Levin A, Hayouka Z, Brack-Werner R, Volsky DJ, Friedler A, Loyter A: Novel regulation of HIV-1 replication and pathogenicity: Rev inhibition of integration.
Protein Eng Des Sel 2009 , 22:753-763. PubMed Abstract | Publisher Full Text
-
Levin A, Hayouka Z, Friedler A, Brack-Werner R, Volsky DJ, Loyter A: A novel role for the viral Rev protein in promoting resistance to Super-infection by Human Immunodeficiency Virus type 1.
J Gen Virol 2010 , 91:1503-1513. PubMed Abstract | Publisher Full Text
-
Levin A, Hayouka Z, Friedler A, Loyter A: Nucleocytoplasmic shuttling of HIV-1 integrase is controlled by the viral Rev protein.[http://www.landesbioscience.com/journals/nucleus/article/11300/] webcite
Nucleus 2010. , 1:PubMed Abstract | PubMed Central Full Text
-
Levin A, Hayouka Z, Helfer M, Brack-Werner R, Friedler A, Loyter A: Peptides derived from HIV-1 integrase that bind Rev stimulate viral genome integration.
PLoS ONE 2009 , 4:e4155. PubMed Abstract | Publisher Full Text | PubMed Central Full Text
-
Levin A, Rosenbluh J, Hayouka Z, Friedler A, Loyter A: Integration of HIV-1 DNA is regulated by interplay between viral Rev and cellular LEDGF/p75 proteins.
Mol Med 2010 , 16:34-44. PubMed Abstract | Publisher Full Text | PubMed Central Full Text
-
Rosenbluh J, Hayouka Z, Loya S, Levin A, Armon-Omer A, Britan E, Hizi A, Kotler M, Friedler A, Loyter A: Interaction between HIV-1 Rev and integrase proteins: a basis for the development of anti-HIV peptides.
J Biol Chem 2007 , 282:15743-15753. PubMed Abstract | Publisher Full Text
-
Levin A, Hayouka Z, Helfer M, Brack-Werner R, Friedler A, Loyter A: Stimulation of the HIV-1 Integrase Enzymatic Activity and cDNA Integration by a Peptide Derived from the Integrase Protein.
Biopolymers 2010 , 93:740-751. PubMed Abstract | Publisher Full Text
-
Jung A, Maier R, Vartanian JP, Bocharov G, Jung V, Fischer U, Meese E, Wain-Hobson S, Meyerhans A: Multiply infected spleen cells in HIV patients.
Nature 2002 , 418:144. PubMed Abstract | Publisher Full Text
-
Roberts NA, Craig JC, Duncan IB: HIV proteinase inhibitors.
Biochem Soc Trans 1992 , 20:513-516. PubMed Abstract
-
Sarojini H, Medepalli K, Terry DA, Alphenaar BW, Wang E: Localized delivery of DNA to the cells by viral collagen-loaded silica colloidal crystals.
Biotechniques 2007 , 43:213-214. PubMed Abstract | Publisher Full Text
216-218, 220-211
-
Mizushima N, Kuma A, Kobayashi Y, Yamamoto A, Matsubae M, Takao T, Natsume T, Ohsumi Y, Yoshimori T: Mouse Apg16L, a novel WD-repeat protein, targets to the autophagic isolation membrane with the Apg12-Apg5 conjugate.
J Cell Sci 2003 , 116:1679-1688. PubMed Abstract | Publisher Full Text
-
Cavin LG, Venkatraman M, Factor VM, Kaur S, Schroeder I, Mercurio F, Beg AA, Thorgeirsson SS, Arsura M: Regulation of alpha-fetoprotein by nuclear factor-kappaB protects hepatocytes from tumor necrosis factor-alpha cytotoxicity during fetal liver development and hepatic oncogenesis.
Cancer Res 2004 , 64:7030-7038. PubMed Abstract | Publisher Full Text
-
Kimpton J, Emerman M: Detection of replication-competent and pseudotyped human immunodeficiency virus with a sensitive cell line on the basis of activation of an integrated beta-galactosidase gene.
J Virol 1992 , 66:2232-2239. PubMed Abstract | PubMed Central Full Text
-
Pizzato M, Erlwein O, Bonsall D, Kaye S, Muir D, McClure MO: A one-step SYBR Green I-based product-enhanced reverse transcriptase assay for the quantitation of retroviruses in cell culture supernatants.
J Virol Methods 2009 , 156:1-7. PubMed Abstract | Publisher Full Text
-
Casabianca A, Gori C, Orlandi C, Forbici F, Federico Perno C, Magnani M: Fast and sensitive quantitative detection of HIV DNA in whole blood leucocytes by SYBR green I real-time PCR assay.
Mol Cell Probes 2007 , 21:368-378. PubMed Abstract | Publisher Full Text
-
Levin A, Hayouka Z, Friedler A, Loyter A: Over expression of the HIV-1 Rev promotes death of non-dividing eukaryotic cells.
Virus Genes 2010 , 40:341-346. PubMed Abstract | Publisher Full Text
-
Aquaro S, Muscoli C, Ranazzi A, Pollicita M, Granato T, Masuelli L, Modesti A, Perno CF, Mollace V: The contribution of peroxynitrite generation in HIV replication in human primary macrophages.
Retrovirology 2007 , 4:76. PubMed Abstract | BioMed Central Full Text | PubMed Central Full Text
nhờ gôgle dịch sang tiếng Ả rập dùm cho hivongthoi, có thể bản dịch chưa được đúng nghĩa lắm, mong bạn thông cảm và bổ sung thêm
Bản dịch từ Tiếng Anh sang Tiếng Ả-rập
تقرير قصير
محددة للقضاء على فيروس نقص المناعة البشرية - 1 من الخلايا المصابة مثقف
أفيعاد
Levin1 البريد الإلكتروني ، والبريد الإلكتروني Hayouka2 تسفي ، عساف
Friedler2 البريد الالكتروني والبريد الالكتروني إبراهيم Loyter1
1
قسم الكيمياء البيولوجية ، ومعهد سيلبرمان الكسندر لعلوم الحياة ،
والجامعة العبرية في القدس ، والحرم الجامعي الصفرا ، جفعات رام ، القدس
91904 ، إسرائيل
2 معهد الكيمياء ، والجامعة العبرية في القدس ، والحرم الجامعي الصفرا ، جفعات رام ، القدس 91904 ، إسرائيل
الكاتب إلكترونية الكاتب المناظرة
أبحاث وعلاج الإيدز لعام 2010 ، 7:31 دوى : 10.1186/1742-6405-7-31
النسخة الإلكترونية من هذه المادة هو واحد كاملة ويمكن الاطلاع على الموقع التالي : http://www.aidsrestherapy.com/content/7/1/31
وردت : 7 مايو 2010
مقبول : 19 أغسطس 2010
تاريخ النشر : 19 أغسطس 2010
© 2010 ليفين وآخرون ؛ المرخص له بيوميد الوسطى المحدودة.
هذا
هو مقال وصول فتح وزعت بموجب أحكام من سمات الإبداعية رخصة العموم
(http://creativecommons.org/licenses/by/2.0) ، الذي يسمح للاستخدام غير
المقيد ، والتوزيع ، والاستنساخ في أي وسيط ، بشرط العمل الأصلي وأشار بشكل صحيح.
تجريدي
وهناك ارتباط بين زيادة في تكامل الإنسان أنشئت من قبل فيروس نقص المناعة - 1 (فيروس نقص المناعة البشرية - 1) [كدنا] وموت الخلية. نحن
هنا تبين أن مجموعة من الببتيدات التي تحفز التكامل مع الأنزيم البروتيني
مانع رو 31-8959 مبرمج تسبب موت الخلية من الخلايا المصابة بفيروس نقص
المناعة البشرية بالفناء الكامل للفيروس. هذه التركيبة لم يكن لها أي تأثير على الخلايا غير المصابة. وهكذا يبدو أن يتم الترويج موت الخلية فقط في الخلايا المصابة. ونحن
نرى أن نتائج وصفها في هذا العمل تقترح نهجا جديدا لتعزيز تحديدا موت
الخلايا المصابة بفيروس نقص المناعة البشرية - 1 ، وبالتالي قد يكون في
نهاية المطاف إلى تطوير علاج جديد وعامة المضادة للفيروسات.
النتائج
لا
يوجد علاج او لقاح المتاحة حاليا لنوع فيروس نقص المناعة البشرية 1 (فيروس
نقص المناعة البشرية - 1) العدوى فضلا عن متلازمة الناتجة المناعة المكتسب
(الإيدز) [1]. بيد
أن العلاج المضاد للفيروسات الرجعية نشطة للغاية (خليط عقاقير هارت) ،
الذي يمنع أنشطة الناسخ العكسي الفيروسية والبروتيني ويحول دون عملية
الاندماج الفيروسات المضيف ، ويستخدم حاليا [2،3]. [ويتحول خليط عقاقير هارت على عملية العدوى الى مرض مزمن 4-6]. وعلاوة على ذلك ، إلى حد كبير من خطر العدوى تخفض إذا اخذ العلاج خليط عقاقير هارت على اليمين بعد التعرض للفيروس ([7].
نهج
جديد العلاجية ومثبطات جديدة مضادة للفيروسات ويجري تطوير مستمر للحصول
على أفضل تقييد عملية الإصابة بفيروس نقص المناعة - 1 [8-19]. ومع ذلك ، مرة واحدة متكاملة وكدنا] الفيروسية في كروموسوم المضيف يكاد يكون من المستحيل لإنهاء عملية العدوى وعلاج الإيدز. وكان
هناك طريقة للقضاء على الفيروس [كدنا] متكاملة من الخلايا المصابة
بالفيروس عن طريق حفز Integrase الفيروسي (في) بوساطة عملية التفكك واقترح
مؤخرا [20،21]. [ولكن ، هذا النهج هو الوحيد في خطواتها الأولية 20].
فيروس
نقص المناعة البشرية - 1 الخلايا المصابة ، على عكس الخلايا المصابة من
الفيروسات القهقرية أخرى ، تتحمل فقط 1-2 نسخ من [كدنا] الفيروسية
المتكاملة [خلية / 22،23]. هذا هو على الرغم من وجود نسخ عديدة من] [كدنا] غير متكاملة 22،24 الفيروسية. في
الآونة الأخيرة أظهرت لنا أن هذا التقييد هو نتيجة لتثبيط للفيروسات في
النشاط ، فضلا عن استيراد برنامجها النووي في وقت مبكر من قبل وأعرب القس
البروتين الفيروسي بعد المراجعة في [التفاعل 25-30]. تعطيل
القس - المعقدة في طريق خلية في المستمدة من الببتيد منفذة ، مثل دائرة
الهجرة والتجنيس ([31] و [INrs 28] ، والنتائج في مجال التكامل متعددة من
[كدنا] الفيروسية [26،28،31]. وقد
أظهرت النتائج السابقة التي متعددة من الحمض النووي الفيروسي التكامل في
مرضى الإيدز قد يؤدي إلى عدم الاستقرار المضيف الجينوم [32]. [والواقع ، وقد تبين وجود علاقة بين تعزيز التكامل المتعددة ، وزيادة في موت الخلايا في الآونة الأخيرة من قبلنا 25].
وبناء
على هذه الملاحظات ونحن قد وضعت نهجا جديدا على وجه التحديد ، والقضاء على
فيروس نقص المناعة البشرية بشكل ملحوظ - 1 الخلايا المصابة وكذلك للقضاء
على virions المعدية من الخلايا المستزرعة. وكما يتبين في الشكل. 1a
، بالإضافة إلى ذلك من تحفيز للاندماج دائرة الهجرة والتجنيس أو الببتيد
INr أو مزيج من الاثنين 150 ميكرومتر (كل) إلى الخلايا المصابة حسب نوع
البرية (وزن) بفيروس نقص المناعة البشرية 1 زيادة كبيرة في ظهور virions
جديدة خلال أول 6-8 أيام بعد الإصابة ( بي). ومع ذلك ، اعتبارا من اليوم الثامن بي ، يمكن ملاحظة انخفاض في إنتاج الفيروس. النتائج في Fig.1b تبين أن درجة من الانخفاض هي مرتبطة مباشرة إلى وزارة الداخلية (تعدد العدوى) من 1 الموبوءة بالفيروس. تم
الحصول على القضاء التام على virions تقريبا عندما أصيب الخلايا ، في وجود
دائرة الهجرة والتجنيس والببتيد INr ، من عيار عال نسبيا من فيروس (الشكل
1b). القضاء
على هذا (الشكل 1a و 1b) ربما يرجع إلى تعزيز موت الخلايا (شكل 1c) ،
والتي بدورها قد تنجم عن الببتيدات التي يسببها تنشيط عملية التكامل (الشكل
1dI وانظر [28]). نتائجنا تشير الى ان فترات طويلة جدا في بي استكمال القضاء على جسيمات فيروس يتم الحصول على (الشكل 1).
thumbnailFigure 1. محددة قتل الخلايا المصابة بفيروس نقص المناعة البشرية - 1. (أ)
أصيب H9 اللمفاويات خلايا تي من وزن 1 - فيروس نقص المناعة البشرية في
وزارة الداخلية من 0.1 ، بالضبط كما هو موضح في خلايا [28] ، ومن ثم تم
علاج المصابين كل يومين مع الجزيئات وأشار أو مجموعات. كل يومين وكان عينة بعدا ، وقدرت له عيار الفيروس عن طريق الفحص المجوس [37] باستخدام الخلايا TZM - از بالضبط كما هو موضح [28]. (ب)
كانت مصابة H9 اللمفاويات مع خلايا تي وزن بفيروس نقص المناعة البشرية (1)
في وزارة الاستخبارات ، وأشار تعامل مع دائرة الهجرة والتجنيس دائرة
الهجرة والتجنيس أو INrs +. وقدرت كمية الإنتاج باستخدام فيروس المجوس الفحص على خلايا TZM - از في 48 ح بي. (ج) مثل (أ) ولكن قدر الخلايا جدوى من فحص الإنتقالي العسكري كما هو موضح في [28]. (دي)
و (dII) مثل (أ) إلا أن متوسط كمية الفيروسية أحداث التكامل [كدنا] /
الخلايا وقدرت كمية من نصف بادئة المتداخلة الاسترداد في الوقت الحقيقي
تماما كما هو موضح في [28]. ونمت الخلايا كما هو موضح في [28]. تم إنتاج الفيروسات والفيروسية عيار الأسهم وقدر كما هو موضح في [29]. تم تجميع وتنقية هضميدات كما هو موضح في [28،31]. وقد استخدمت تركيزات التالية : عزت 2 ميكرومتر ، رو 31-8959 10 نانومتر ، دائرة الهجرة والتجنيس / INrs 150 ميكرومتر. وبريفورميد كل تجربة ما لا يقل عن ثلاث مرات مع الخطأ النسبي لم يكن أكثر ± 10 ٪. أشرطة خطأ يمثل الانحراف المعياري.
عندما
محددة فيروس نقص المناعة البشرية مثبط البروتياز - 1 (رو 31-8959 [33])
وأضيف إلى الخلايا المصابة بالفيروس مع أي دائرة الهجرة والتجنيس أو في
الببتيد INrs أو مع كل من (المعين هو مزيج من دائرة الهجرة والتجنيس ،
وINrs رو 31-8959 كما
ميكس ، انظر الشكل رقم 1) زيادة الانتاج فيروس (الشكل 1a) ، والتكامل في
[كدنا] الفيروسية (الشكل 1dII) فقط ولوحظ خلال الأيام الأولى 2-4 بي. من
ناحية أخرى يمكن ملاحظة انخفاض حاد في إنتاج الفيروس على حد سواء والتكامل
[كدنا] من اليوم الرابع بي ، وعلى ليصل إلى أدنى من المستويات في الكشف عن
وجود مزيج (الشكل 1a و1dII). كما يمكن أن يرى (الشكل 1c) حوالي 40 ٪ من الخلايا مثقف توفي في اليوم التالي الثامنة بي إضافة ميكس. ربما هذه النسبة تمثل القيمة النسبية للفيروس الخلايا المصابة ، مما يدل على الأرجح عدد الوفيات من هذه الخلايا. وعلاوة
على ذلك ، نتائجنا (الشكل 1a و1dII) تبين بوضوح أن في هذا الوقت (8 أيام
بي) أن الغالبية العظمى من الفيروس وتنظيفها من الثقافة. ولذلك
فإنه من الممكن تصور أن الزيادة في النسبة المئوية للخلايا قابلة للحياة
ولاحظ الباحث الرئيسي بين 8-12 أيام (الشكل 1c) ومن المقرر ان تقسيم
الخلايا غير المصابة.
لتحديد
ما إذا كان العلاج أعلاه (الجمع بين دائرة الهجرة والتجنيس وINrs + رو
31-8959) عن نتائج بالفعل في القضاء على virions المصابين وإنهاء عملية
العدوى ، وأجريت التجربة التالية : أصيب الخلايا مثقف من فيروس نقص المناعة
البشرية في وزارة الداخلية وزن من
(1) وعولج 24 ساعة خلايا بي ، كل يومين ، مع رو 31-8959 ، دائرة الهجرة
والتجنيس + رو 31-8959 ، INrs + رو 31-8959 أو من مزيج لمدة مجموعه
أسبوعين. وبعد هذه الفترة وترك الخلايا المعالجة إلى النمو ، وبدون علاج ، لمدة أسبوعين إضافيين.
في
نهاية كل واحدة من تلك الفترات وهي : مرحلة ما قبل العلاج ، وبعد اسبوعين
من العلاج وبعد اسبوعين من انتهاء العلاج (أربعة أسابيع بي) ، ومتوسط كميات
من نسخ الحمض النووي الريبي الفيروسي / الخلية (الشكل 2a) ، بلغ مجموع نسخ
الحمض النووي الفيروسي /
الخلايا (الشكل 2b) وكدنا] الفيروسية المتكاملة / الخلية (الشكل 2C) فضلا
عن كميات من البروتين الفيروسي ضد المضاد الجيني p24 (شكل 2d) ومظهر جديد
virions (الشكل 2E) وقدرت.
thumbnailFigure 2. القضاء على فيروس نقص المناعة البشرية - 1 العدوى. H9 اللمفاويات أصيب تي الخلايا مع وزن - 1 فيروس نقص المناعة البشرية في وزارة الداخلية من 1 ، بالضبط كما هو موضح في [28]. ابتداء من 24 ساعة وكانت النسبة الثابتة للعلاج الخلايا المصابة كل يومين مع الجزيئات وأشار لمدة أسبوعين. في نهاية العلاج أسبوعين ، وتركت دون علاج الخلايا في النمو. (أ)
ويقدر متوسط كمية نسخ الحمض النووي الريبي الفيروسي في الخلية كما هو موضح
في [38] : قبل العلاج ، في نهاية أسبوعين من العلاج واسبوعين بعد انتهاء
العلاج (بي أربعة أسابيع). (ب) نفس ما ورد في (أ) ، ولكن قدر متوسط كمية الحمض النووي الفيروسي نسخ لكل خلية كما هو موضح في [29،39]. (ج) نفس ما ورد في (أ) ، ولكن قدر متوسط من الأحداث التكامل في الخلايا كما هو موضح في [28]. (د)
نفس ما ورد في (أ) ، ولكن قدر متوسط كمية الفيروسية ضد المضاد الجيني p24
كما هو موضح في [30] (ه) وقدرت كمية الفيروس المعدية التي تنتجها الخلايا ،
كما هو موضح في [28]. جميع الإعلانات الشروط الأخرى المبينة في الشكل. 1.
وكما
يلاحظ انخفاض كبير في إنتاج فيروس والتكامل لوحظ بعد المعالجة الأولى
اسبوعين (الشكل 2) ، ومع ذلك ، عندما تم إنهاء المعاملة مع توليفات مختلفة
من الببتيد ومثبطات الأنزيم البروتيني ، واستعادة الانتاج الفيروس والتكامل
فيما عدا في الخلايا تعامل مع مزيج ، مما يشير إلى القضاء على مزيج من حالات العدوى التي يسببها الكامل (الشكل 2).
ويبدو أن دائرة الهجرة والتجنيس وفاة الخلايا INrs الناجمة في معظمها عن طريق ممر caspase موت الخلايا المبرمج التي تعتمد على 3. ويمكن الاستدلال على ذلك من تحليل غربية لطخة مما يدل على ظهور caspase نشط 3 (علامة موت الخلايا المبرمج ([34]) (الشكل 3). من
ناحية أخرى ، يمكن أن يلاحظ أي موت الخلايا الالتهام الذاتي أو نخر بعد
تحليل لطخة غربية باستخدام المضادة apg16 (علامة الالتهام الذاتي [35]) أو
TNFα (علامة نخر [36]) على التوالي (الشكل 3). كما هو متوقع -- وكما لاحظ في الشكل. 2d
-- تحليل غربية لطخة كما تبين أن هناك انخفاض في انتاج ضد المضاد الجيني
p24 في الخلايا المعالجة من قبل مثبط البروتياز رو 31-8959 (الشكل 3). وبالإضافة
إلى كل من دائرة الهجرة والتجنيس وINrs الببتيدات التي تحفز الاندماج
والعدوى أيضا حفز انتاج ضد المضاد الجيني p24 الشكل 3 (وانظر أيضا :
[28،31]). هذه الزيادة في الإصابة في علاقة مباشرة لموت الخلية مبرمج (الشكل 3) ، وانظر أيضا : [28،31]). من
ناحية أخرى ، عندما أضيف 31-8959 رو جنبا إلى جنب مع دائرة الهجرة
والتجنيس ، INrs أو كليهما ، إلى انخفاض كبير في ضد المضاد الجيني p24 فضلا
عن زيادة في موت الخلايا مبرمج ويمكن ملاحظة (الشكل 3).
thumbnailFigure 3. العلاقة بين موت الخلية وعلاجه. H9 اللمفاويات أصيب تي الخلايا مع وزن - 1 فيروس نقص المناعة البشرية في وزارة الداخلية من 1 ، بالضبط كما هو موضح في [28]. ابتداء من 24 ساعة وكانت النسبة الثابتة للعلاج الخلايا المصابة كل يومين مع الجزيئات وأشار لمدة أسبوعين. بعد
اسبوعين من العلاج وlysed الخلايا كما هو موضح في تعرضوا [25،29] وlaysets
وصمة عار للتحليل الغربي للالأكتين كما هو موضح في [25،29] لعلامات موت
الخلية (Apg16 علامة للحصول على الالتهام الذاتي [35] ، تنف
α علامة للحصول على نخر [36]) ، ونشط caspase 3 علامة للحصول على موت
الخلايا المبرمج ([34]) كما هو موضح في [40]) ، ولضد المضاد الجيني p24
الفيروسي كما هو موضح في [41].
وتجدر
الإشارة إلى أن إمكانية شارك فيها عدد منخفض متكامل الحمض النووي الفيروسي
هو لا يزال حاضرا في حالة كامنة لا يمكن استبعاد تماما. وعلاوة على ذلك في الوقت الحاضر تجارب تجرى في المختبر لدينا من أجل دراسة إعادة تنشيط تلك القلة -- إن وجدت proviruses الكامنة --.
نخلص
إلى أن تنشيط التكامل الفيروسية من قبل دائرة الهجرة والتجنيس والببتيدات
INrs ، بالإضافة إلى منع إنتاج virion من مثبط الأنزيم البروتيني ، لم يؤد
فقط في منع فيروس نقص المناعة البشرية - 1 العدوى ولكن أيضا في إبادة
الخلايا المصابة من خلال التذرع موت الخلايا المبرمج. ولقد مهدت هذه المعاملة ثقافة خلية من الخلايا التي تحمل proviruses متكاملة. ويضاف
إلى ذلك إلا أن النهج رواية الموصوفة هنا لعلاج الإيدز ليست سوى في
خطواتها الأولى ، ومحاولات أخرى لتحسين نشاط الببتيدات تحفيز تجري حاليا في
المختبرات لدينا.
المصالح المتنافسة
ويعلن الكتاب أن لديهم أي مصالح متنافسة.
المؤلفين المساهمات
ألف
ليفين تصميم وإجراء التجارب وتحليل البيانات وساهم في كتابة ورقة ؛ زكية
تنفيذ التوليف الببتيد وتنقية ؛ بالعربية تهدف هذه الدراسة ، وساهم في
كتابة ؛ ألف Loyter صممت هذه الدراسة ، ساهم في كتابة ورقة ومنسقة الدراسة. لقد قرأت كل كتاب ، ووافق على المخطوطة.
شكر وتقدير
وأيد هذا العمل من قبل مؤسسة العلوم الإسرائيلية (أ. Loyter) ومنحة بدءا من مجلس البحوث الأوروبي (المنسق) (لبالعربية). وقدمت
خلايا وزن وفيروس نقص المناعة البشرية - 1 من برنامج الكاشف المعاهد
الوطنية للصحة ، وشعبة من الإيدز ، والمعدية ، المعاهد الوطنية للصحة
(بيثيسدا ، ماريلاند ، الولايات المتحدة الأمريكية).
المراجع
1.
روب حركة التحرير : فشل لقاح فيروس نقص المناعة البشرية ميرك : خطوة إلى الأمام غير مؤكد.
لانسيت 2008 ، 372:1857-1858. بوبمد خلاصة الناشر | OpenURL النص الكامل
2.
فيروس
ممرض بشدة جمهورية مقدونيا ، جي دبليو Mellors ، مد Havlir ، يانوش ايرون
وجيم غونزاليس ، مد مكماهون ، دد ريتشمان ، قدم الحب ، لام جوناس Meibohm
ألف ، وآخرون : المعاملة مع indinavir ، زيدوفودين ، ولاميفودين في
البالغين الذين يعانون من نقص المناعة البشري وعدوى فيروس قبل العلاج المضاد للفيروس.
نون ياء Engl ميد 1997 ، 337:734-739. بوبمد خلاصة الناشر | OpenURL النص الكامل
3.
Lalezari
ج ب ، ك هنري م O'Hearn ، شبيبة مونتانير ، بيتاجول Piliero وباء تروتييه ،
ق والمسلي ، جيم كوهين ، الدكتور Kuritzkes ، ايرون يانوش الابن ، وآخرون :
Enfuvirtide ، مثبط فيروس نقص المناعة البشرية الانصهار - 1 ، لالمقاوم
للأدوية الإصابة بفيروس نقص المناعة في أمريكا الشمالية والجنوبية.
نون ياء Engl ميد 2003 ، 348:2175-2185. بوبمد خلاصة الناشر | OpenURL النص الكامل
4.
rognostic importance of initial response in HIV-1 infected patients starting" style="background-color: #ffffff;">Chene
زاي ، ج. ستيرن ، ام أيار / مايو ، مد Costagliola ، Ledergerber باء ،
وفيليبس ، Dabis واو وياء وندغرين ، D' ارمينيو وMonforte ، دي وولف واو ،
وآخرون : النذير أهمية الاستجابة الأولية للمرضى المصابين بفيروس نقص
المناعة البشرية - 1 بدء العلاج المضاد للفيروسات الرجعية قوية : تحليل للدراسات المستقبلية.
لانسيت 2003 ، 362:679-686. بوبمد خلاصة الناشر | OpenURL النص الكامل
5.
Palella
إف جيه الابن ، ديلاني كم ، Moorman المتردد ، مو بلا حب ، ياء الفوهرر ،
ألجأ Satten ، دي جي Aschman ، هولمبرغ التنمية المستدامة : انخفاض معدلات
الاعتلال والوفيات بين المرضى الذين يعانون من نقص المناعة البشرية
المتقدمة عدوى الفيروس. المحققون دراسة فيروس نقص المناعة البشرية العيادات الخارجية.
نون ياء Engl ميد 1998 ، 338:853-860. بوبمد خلاصة الناشر | OpenURL النص الكامل
6.
الخشب
هاء ، جمهورية صربسكا هوغ وباء ييب ، والعلاقات العامة هاريجان ، ام
O'Shaughnessy ، مونتانير شبيبة : هل هناك خلايا CD4 العد الأساسية التي
تحول دون استجابة لبقاء العلاج المضاد للفيروسات الحديثة؟
الإيدز عام 2003 ، 17:711-720. بوبمد خلاصة الناشر | OpenURL النص الكامل
7.
مروحة ه ، الترددات اللاسلكية كونر ، فياريال ليرة لبنانية : الإيدز : العلم والمجتمع. 4 طبعة. جونز والناشرين بارتليت ، 2005. OpenURL
8.
تشيو
ملح ، والخامس باء سوروس ، جي Kreisberg ، ك Stopak ، دبليو Yonemoto ،
مرحاض غرين : الخليوي APOBEC3G يقيد فيروس نقص المناعة البشرية في حالات
العدوى - 1 يستريح خلايا CD4 + ت.
طبيعة 2005 ، 435:108-114. بوبمد خلاصة الناشر | OpenURL النص الكامل
9.
Donzella
الجمعية العامة ، مد Schols ، جنوب غرب لين ، ج. إستي ، كا Nagashima ،
بيتاجول Maddon ، سباق الجائزة الكبرى Allaway ، Sakmar ن ، ع هينسون ، دي
كليرك ه ، ج ب مور : AMD3100 ، مثبط جزيء صغير من فيروس نقص المناعة
البشرية - 1 الدخول عن طريق المشاركة في CXCR4 مستقبلات.
ميد نات 1998 ، 4:72-77. بوبمد خلاصة الناشر | OpenURL النص الكامل
10.
Hauber
الأول ، مد Bevec ، Heukeshoven ياء ، واو Kratzer ، واو القرن ، Choidas
ألف ، تي Harrer ، Hauber ياء : تحديد synthase deoxyhypusine الخلوية كهدف
رواية عن العلاج المضاد للفيروسات.
ياء كلين الاستثمار عام 2005 ، 115:76-85. بوبمد بوبمد | خلاصة الوسطى النص الكامل OpenURL
11.
Hazuda
دي جي ، والتنمية المستدامة يونغ ، جي بي غوار ، ونيو جيرسي أنتوني ،
البرنامج العادي غوميز ، شبيبة واي ، ج ب Vacca ، لام Handt ، م Motzel
وكلاين هجرية ، وآخرون : مثبطات المناعة الخلوية وIntegrase قمع تكرار
فيروسات في قرود المكاك القرد.
العلوم عام 2004 ، 305:528-532. بوبمد خلاصة الناشر | OpenURL النص الكامل
12.
Huthoff ه ، معلم متولى حسن : deamination Cytidine والمقاومة للعدوى فيروس : نحو فهم الهيكلية للبروتينات APOBEC.
علم الفيروسات عام 2005 ، 334:147-153. بوبمد خلاصة الناشر | OpenURL النص الكامل
13.
بيرو م : الخصوم CCR5 لعلاج الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية ومرض الإيدز.
في التقدم في تصميم الأدوية المضادة للفيروسات المصحح : دي كليرك E. 2007 ، 5:185-212. الناشر OpenURL النص الكامل
14.
دي كليرك البريد : تاريخ مضادات الفيروسات القهقرية : اكتشافات رئيسية على مدى السنوات ال 25 الماضية.
ميد 2009 Virol المراجعة ، 19:287-299. بوبمد خلاصة الناشر | OpenURL النص الكامل
15.
Pommier نعم ، ألف ألف جونسون ، جيم مارشان : مثبطات Integrase لعلاج فيروس نقص المناعة البشرية / الإيدز.
نات Discov المخدرات المراجعة عام 2005 ، 4:236-248. بوبمد خلاصة الناشر | OpenURL النص الكامل
16.
قصب السلطة الفلسطينية : التطورات الجديدة في مقاومة الجراثيم للأدوية فيروس نقص المناعة البشرية.
ياء Chemother Antimicrob 2009 ، 64 (ملحق 1) : i37 - 40. بوبمد خلاصة الناشر | OpenURL النص الكامل
17.
دي كليرك هاء : ونيكليوزيد حلقية phosphonates من البداية إلى استخدام السريرية : منظور تاريخي.
بحوث المضادة للفيروسات 2007 ، 75:1-13. بوبمد خلاصة الناشر | OpenURL النص الكامل
18.
DeJesus
هاء ، دال بيرغر ، ام ماركويتز ، جيم كوهين ، تي هوكينز ، Ruane ف ، ص
Elion وجيم ربع البنس ، لام تشونغ تشنغ العدالة والتنمية ، وآخرون : النشاط
المضادة للفيروسات ، الدوائية ، والاستجابة للجرعة - 1 ع فيروس نقص
المناعة البشرية المانع integrase -9137 (JTK - 303) في المرضى الذين يعانون من السذاجة المعاملة والعلاج من ذوي الخبرة.
ياء Acquir متلازمه Defic المناعي 2006 ، 43:1-5. بوبمد خلاصة الناشر | OpenURL النص الكامل
19.
Steigbigel
الرايت ، دا كوبر ، والسندات الإذنية كومار ، التهاب الدماغ الياباني
ايرون ، شيشتر م ، م ماركويتز ، لطفي السيد ، جى لينوكس ، فاليس Gatell ،
Rockstroh كيه ، وآخرون : Raltegravir مع خلفية العلاج الأمثل لمقاومة
العدوى بفيروس نقص المناعة البشرية 1.
نون ياء Engl ميد 2008 ، 359:339-354. بوبمد خلاصة الناشر | OpenURL النص الكامل
20.
Engelman ج : الإيدز / فيروس نقص المناعة البشرية. وعكس الحظ في فيروس نقص المناعة البشرية التكامل - 1.
العلوم عام 2007 ، 316:1855-1857. بوبمد خلاصة الناشر | OpenURL النص الكامل
21.
ساركار
الأول ، Hauber طاء ، ياء Hauber ، Buchholz واو : 1 الختان بفيروس نقص
المناعة البشرية باستخدام الحمض النووي proviral recombinase تطورت.
العلوم عام 2007 ، 316:1912-1915. بوبمد خلاصة الناشر | OpenURL النص الكامل
22.
بتلر م ، ماجستير هانسن ، البوشمن فد : لفحص الحمض النووي للتكامل كمية الفيروس في الجسم الحي.
ميد نات 2001 ، 7:631-634. بوبمد خلاصة الناشر | OpenURL النص الكامل
23.
Gelderblom
المفوض السامي ، الاسم المميز Vatakis ، سا بيرك ، والتنمية المستدامة
لوري ، القيادة العامة بريستول ، ليفي الاسم المميز : تكامل الفيروسية
فيروس نقص المناعة البشرية يسمح - 1 تكرارها دون التكامل.
Retrovirology 2008 ، 5:60. بيوميد بوبمد | خلاصة الوسطى | النص الكامل بوبمد الوسطى النص الكامل OpenURL
24.
طوماس
فيبس تشون ، لام Carruth ، مد Finzi ، س شين ، ج. DiGiuseppe ، ح تايلور ،
Hermankova م ، ك تشادويك ، ياء Margolick ، كوين والتعاون التقني ،
وآخرون : الكمي من الخزانات الكامنة الأنسجة والجسم مجموع الحمل الفيروسي
في فيروس نقص المناعة البشرية - 1 العدوى.
طبيعة 1997 ، 387:183-188. بوبمد خلاصة الناشر | OpenURL النص الكامل
25.
ليفين
و، Hayouka ى ، ص براك فيرنر ، دي جي فولسكي ، وFriedler ، وLoyter :
رواية تنظيم بفيروس نقص المناعة البشرية 1 تكرار والمرضية : القس إعاقة
التكامل.
بروتين المهندس ديس سيل 2009 ، 22:753-763. بوبمد خلاصة الناشر | OpenURL النص الكامل
26.
ليفين
و، زد Hayouka ، Friedler ألف ، ص براك فيرنر ، دي جي فولسكي ، Loyter ج :
رواية للدور البروتين الفيروسي المراجعة في تعزيز مقاومة فائقة العدوى من
نوع فيروس نقص المناعة البشرية 1.
ياء Virol الجنرال عام 2010 ، 91:1503-1513. بوبمد خلاصة الناشر | OpenURL النص الكامل
27.
ويتم
التحكم ليفين ، زد Hayouka ، وFriedler ، Loyter ج : السيتوبلازمية
النووية مكوكية من فيروس نقص المناعة البشرية - 1 integrase من البروتين
الفيروسي القس. [webcite
http://www.landesbioscie...s/nucleus/article/11300/]
نواة لعام 2010. ubMed Abstract | PubMed Central Full Text OpenURL" style="background-color: #ffffff;">(1) : بوبمد | خلاصة بوبمد الوسطى النص الكامل OpenURL
28.
ليفين
و، زد Hayouka ، هلفر م ، ص براك فيرنر ، وFriedler ، Loyter ج : هضميدات
المستمدة من فيروس نقص المناعة البشرية - 1 integrase أن القس ربط حفز
التكامل الجينوم الفيروسي.
بلوس واحد عام 2009 ، (4) : e4155. بوبمد بوبمد خلاصة الناشر | | النص الكامل الوسطى النص الكامل OpenURL
29.
وينظم
ليفين ألف وياء Rosenbluh ، زد Hayouka ، وFriedler ، وLoyter : إدماج
فيروس نقص المناعة البشرية عن طريق الحمض النووي - 1 التفاعل بين القس
الفيروسية والبروتينات الخلوية LEDGF/p75.
ميد مول عام 2010 ، 16:34-44. بوبمد بوبمد خلاصة الناشر | | النص الكامل الوسطى النص الكامل OpenURL
30.
Rosenbluh
ياء ، Hayouka ى ، ق جيرغا ، ليفين و، ارمون ألف عمر وهاء Britan ، وHizi ،
ام كوتلر ، وFriedler ، وLoyter : التفاعل بين فيروس نقص المناعة البشرية -
1 المراجعة والبروتينات integrase : أساس للتنمية لمكافحة الببتيد فيروس نقص المناعة البشرية.
ياء علم Biol 2007 ، 282:15743-15753. بوبمد خلاصة الناشر | OpenURL النص الكامل
31.
ليفين
و، زد Hayouka ، هلفر م ، ص براك فيرنر ، وFriedler ، Loyter ج : حفز
بفيروس نقص المناعة البشرية 1 Integrase الأنزيمية النشاط والتكامل [كدنا]
من الببتيد المستمدة من البروتين Integrase.
بوليمرات 2010 ، 93:740-751. بوبمد خلاصة الناشر | OpenURL النص الكامل
32.
جونغ
ألف ، آر ماير ، ج ب فارتانيان ، مجموعة Bocharov ، والخامس جونغ يو فيشر ،
ميس هاء ، وين ، هوبسون قاف ، وMeyerhans : ضرب الخلايا المصابة في الطحال
مرضى فيروس نقص المناعة البشرية.
طبيعة 2002 ، 418:144. بوبمد خلاصة الناشر | OpenURL النص الكامل
33.
ن. روبرتس ، جي سي كريغ ، باء دنكان : فيروس نقص المناعة البشرية مثبطات proteinase.
Biochem سوك ترانس 1992 ، 20:513-516. بوبمد OpenURL الخلاصة
34.
ساروجينى
ه ، ك Medepalli ، دا تيري ، Alphenaar الأسلحة البيولوجية ، وانغ هاء :
تسليم المترجمة من الحمض النووي في الخلايا الفيروسية السيليكا الكولاجين
محملة بلورات الغروية.
التقنيات البيولوجية عام 2007 ، 43:213-214. بوبمد خلاصة الناشر | OpenURL النص الكامل
216-218 ، 220-211
35.
ميزشيما
نون ، وكوما ، ص كوباياشي ، وياماموتو ، Matsubae إم ، تي تاكاو ، تي
Natsume ، Ohsumi نعم ، تي Yoshimori : ماوس Apg16L ، وهو بروتين يسترن
ديجيتال ، تكرار الرواية ، والأهداف التي الغشاء العزلة autophagic مع
المتقارن Apg12 - Apg5.
العلوم خلية ياء 2003 ، 116:1679-1688. بوبمد خلاصة الناشر | OpenURL النص الكامل
36.
كافين
إل جي ، م Venkatraman ، الظاهري عامل ، كاور قاف ، أنا شرودر ، واو
ميركوريو ، ألف ألف التسول ، وقوات الأمن الخاصة ثورغيرسون ، ام Arsura :
تنظيم fetoprotein ألفا بحلول النووية kappaB عامل يحمي خلايا الكبد من
عامل نخر الورم ألفا خلال تطوير السمسة الكبد الجنين وoncogenesis كبدي.
بحوث السرطان عام 2004 ، 64:7030-7038. بوبمد خلاصة الناشر | OpenURL النص الكامل
37.
Kimpton
ياء ، ميم Emerman : الكشف عن النسخ المتماثل ، pseudotyped المختصة
وفيروس نقص المناعة البشرية مع خط الخلايا الحساسة على أساس تفعيل وجود
الجين متكاملة بيتا galactosidase.
ياء Virol 1992 ، 66:2232-2239. بوبمد بوبمد | خلاصة الوسطى النص الكامل OpenURL
38.
Pizzato
ميم ، يا Erlwein ، Bonsall دال ، كاي اس ، موير دال ، مكلور مو : خطوة
واحدة SYBR الأخضر الأول على أساس المنتج محسنة فحص النسخ العكسي لتحديد
الكميات من الفيروسات القهقرية في supernatants ثقافة الخلية.
أساليب Virol ياء 2009 ، 156:1-7. بوبمد خلاصة الناشر | OpenURL النص الكامل
39.
Casabianca
أ ، ج غوري ، جيم اورلاندي ، واو Forbici ، فيديريكو جيم Perno ، Magnani م
: سريعة وكشف كمية من الحمض النووي الحساسة فيروس نقص المناعة البشرية في
leucocytes الدم الكامل من قبل SYBR الخضراء أنا مقايسة الاسترداد في الوقت
الحقيقي.
تحقيقات خلية مول 2007 ، 21:368-378. بوبمد خلاصة الناشر | OpenURL النص الكامل
40.
ليفين
و، زد Hayouka ، وFriedler ، Loyter ج : أكثر من تعبير عن فيروس نقص
المناعة البشرية - 1 القس يعزز فاة غير تقسيم الخلايا حقيقية النواة.
جينات فيروس عام 2010 ، 40:341-346. بوبمد خلاصة الناشر | OpenURL النص الكامل
41.
Aquaro
قاف ، جيم Muscoli ، وRanazzi ، ام Pollicita ، تي Granato ، Masuelli لام
، وموديستي ، Perno قوات التحالف ، والخامس Mollace : مساهمة الجيل
peroxynitrite في تكرار فيروس نقص المناعة البشرية في الضامة الأولية
الإنسان.
Retrovirology 2007 ، 4:76. بيوميد بوبمد | خلاصة الوسطى | النص الكامل بوبمد الوسطى النص الكامل OpenURL
|
|
|
|
|
|
 Danh hiệu: Thành viên gắn bóNhóm: Thành viên chính thức
Gia nhập: 12-07-2008(UTC)
Bài viết: 1.387
Đến từ: Hài hước giúp bạn tiến gần đến thành công hơn.
Cảm ơn: 2 lần
Được cảm ơn: 216 lần trong 156 bài viết
|
Chết tía bà hàng xóm rùi, Thằng Mắc Dịch học tiếng campuchia 20 năm bây giờ phải về xin mẹ tiền học tiếng a rập thôi,hiểu được Thằng Mắc Dịch trào bọt mép chết liền. | Bạn đang lo lắng về HIV, thời gian phơi nhiễm sắp hết. Bạn cứ ĐT : .. Vui lòng không nhắn tin,chỉ chia sẻ điện thoại trực tiếp |
|
|
|
|
|
 Danh hiệu: Thành viên gắn bóNhóm: Hội viên Câu lạc bộ ARV
Gia nhập: 12-04-2010(UTC) Bài viết: 2.344  Đến từ: aidsmeds.com; medhelp.org; thebody.com; cdc.gov Thanks: 36 times
Được cảm ơn: 762 lần trong 513 bài viết
|
Ặc đọc phần tiếng Anh đã mỏi hết cả mắt rồi chưa xong giờ lại tiếng Ả Rập thì botay.com | Smile được biết a Tuanmesedec sẽ chuyển sang trang web của anh ấy để tư vấn và ít về room này nữa. Smile ẫn sẽ ở lại room nhưng sẽ sang giúp anh Tuấn một tay.
|
|
|
|
|
|
 Danh hiệu: Thành viên gắn bóNhóm: Thành viên chính thức
Gia nhập: 27-02-2010(UTC)
Bài viết: 862
Cảm ơn: 46 lần
Được cảm ơn: 161 lần trong 132 bài viết
|
trời ơi tiếng anh vơí tiếng a rập ,nicky ko hiểu gì hết ráo
mằn kiu haì dón khiú chọ
|
|
|
|
|
|
Danh hiệu: Thành viên danh dựMedals: Nhóm: Administrators, Thành viên chính thức, BQT, Tham vấn viên Diễn đàn
Gia nhập: 06-03-2006(UTC)
Bài viết: 1.459
Đến từ: TPHCM
Cảm ơn: 74 lần
Được cảm ơn: 511 lần trong 232 bài viết
|
nicky đã viết:trời ơi tiếng anh vơí tiếng a rập ,nicky ko hiểu gì hết ráo
mằn kiu haì dón khiú chọ
rùi, nhờ giang hồ dịch:"..muỗi cắn.....khó chịu" 
|
|
|
|
|
|
Danh hiệu: MemberNhóm:
Gia nhập: 12-09-2010(UTC)
Bài viết: 19
Đến từ: sai gon
Cảm ơn: 2 lần
Được cảm ơn: 3 lần trong 3 bài viết
|
Ôi mẹ ơi,bác Peter nhiệt tình quá.cảm ơn bác.sau khi nhờ thằng bạn nước Lào đọc nó phán 1 câu "Đọc xong cái nàythà bị nhiễm H còn sướng hơn"
|
|
|
|
|
|
Di chuyển
Bạn không thể tạo chủ đề mới trong diễn đàn này.
Bạn không thể trả lời chủ đề trong diễn đàn này.
Bạn không thể xóa bài của bạn trong diễn đàn này.
Bạn không thể sửa bài của bạn trong diễn đàn này.
Bạn không thể tạo bình chọn trong diễn đàn này.
Bạn không thể bỏ phiếu bình chọn trong diễn đàn này.
|
