Trang chủ HIV  |  Web Link  |  Giới thiệu |  Liên hệ  |  English 
hiv logo

Thông báo

Icon
Error

Đăng nhập


Tùy chọn
Xem bài viết cuối Go to last unread
Offline qwerty.  
#1 Đã gửi : 31/07/2013 lúc 03:16:13(UTC)
qwerty.

Danh hiệu: Thành viên gắn bó

Nhóm: Thành viên chính thức, Tham vấn viên Diễn đàn
Gia nhập: 08-12-2012(UTC)
Bài viết: 267
Woman
Đến từ: kizciti tphcm

Thanks: 629 times
Được cảm ơn: 415 lần trong 209 bài viết
4.1. Phương pháp gián tiếp:

4.1.1.1.1. ELISA gián tiếp: Độ nhạy cao
4.1.1.1.2. ELISA sandwich: độ đặc hiệu và độ nhạy cao.
4.1.1.1.3. ELISA cạnh tranh: Độ nhạy cao.

ƯU VÀ NHƯỢC ĐIỂM THỬ NGHIỆM MIỄN DỊCH GẮN MEN – ELISA.

* Ưu điểm:
- Thực hiện đồng thời được nhiều mẫu.
- Đọc kết quả bằng máy không phụ thuộc vào chủ quan của con người.
- Có thể lưu kết quả, thuận lợi cho kiểm tra đánh giá chất lượng xét nghiệm.
- Giá thành tương đối rẻ.

* Hạn chế:
- Phải đầu tư trang thiết bị ban đầu và bảo dưỡng máy.
- Sinh phẩm phải bảo quản lạnh.
- Nhân viên xét nghiệm phải được đào tạo.
- Thời gian thực hiện: 3 – 4 giờ.
- Nếu số lượng mẫu ít thì tốn kém vì phải làm nhiều chứng. 

4.1.1.2. Các thử nghiệm nhanh.

4.1.1.2.1. Thử nghiệm ngưng kết hạt Serodia:

4.1.1.2.2. Các thử nghiệm nhanh: 
- Kit Determine HIV1/2: dựa trên nguyên lý miễn dịch sắc ký. (Thường sử dụng để kiểm tra HIV gấp và luôn phải được kiểm chứng bằng kỹ thuật khác) 
- Kit Multispot HIV1/2: là phương pháp miễn dịch trên màng lọc, dựa trên nguyên lý ELISA (Phân biệt được HIV1 và HIV2).

* Ưu điểm:
- Xét nghiệm với số lượng mẫu nhỏ.
- Dễ thực hiện, cho kết quả nhanh. 
- Không đòi hỏi thiết bị đặc biệt, sinh phẩm dễ bảo quản.
- Có thể thực hiện ở các tuyến cơ sở.
- Xét nghiệm viên có thể được đào tạo nhanh.

* Nhược điểm:
- Giá thành cao.
- Không thuận lợi khi xét nghiệm số mẫu lớn.
- Không lưu được dữ liệu kỹ thuật. 
- Một số test nhanh có độ nhạy kém hơn so với ELISA.

4.1.2. Xét nghiệm khẳng định.
Western blot (Kit New Lab blot I ):
Phát hiện phức hợp KN-KT bằng cộng hợp KT kháng IgG gắn men, cho phản ứng màu với cơ chất tại các vị trí có KT đặc hiệu với KN tương ứng. Western blot có độ nhạy và độ đặc hiệu cao; song giá thành cao và đòi hỏi người xét nghiệm phải có trình độ và kinh nghiệm.


4.2. Phương pháp trực tiếp:

4.2.1. Phân lập virus bằng nuôi cấy tế bào.
- Xác định sự nhân lên của virus bằng kỹ thuật:
* ELISA phát hiện KN p24 trong nước nổi môi trường nuôi cấy tế bào.
* Dùng đồng vị phóng xạ phát hiện enzyme sao chép ngược của virus (RT). 

4.2.2. Phát hiện các axit nucleic (RNA) của virus hoặc DNA (provirut) trong tế bào nhiễm.
* RNA của virus HIV bằng kỹ thuật RT-PCR:
* Ưu điểm: có độ nhạy cao, cho kết quả nhanh chóng.
* Hạn chế: phải có cơ sở phòng thí nghiệm đủ tiêu chuẩn và trang thiết bị đắt tiền. Cán bộ cần đào tạo tốt.

4.2.3. Phát hiện KN p24 của virus trong máu.
- p24 là một chỉ số trực tiếp phản ánh sự nhân lên của virut
- Được phát hiện sớm trong giai đoạn mới nhiễm.
- Giảm khi có KT kháng p24.
- Gia tăng khi chuyển sang giai đoạn AIDS 

Kit phát hiện p24: ELISA sandwich.

4.3. Lựa chọn kỹ thuật xét nghiệm HIV.

4.3.1. Sự biến động của các thông số sinh học trên bệnh nhân nhiễm HIV chưa điều trị.
- Kháng nguyên HIV đặc hiệu KNp24 xuất hiện sớm, một thời gian ngắn sau nhiễm HIV và duy trì trong suốt thời gian cấp (sớm) của nhiễm HIV. Sau đó KNp24 giảm dần đồng thời có sự xuất hiện KTp24. Điều này báo hiệu giai đoạn không triệu chứng của nhiễm HIV.
- Vài tháng tới vài năm sau nhiễm trùng, KTp24 mất đi v KNp24 tái xuất hiện, báo giai đoạn triệu chứng của bệnh. Sự nhân lên của HIV tương ứng với sự có mặt của KNp24.
- Kháng thể HIV: Trước tiên kháng thể HIV lớp IgM xuất hiện, sau đó giảm dần và thay vào đó là KT lớp IgG. IgG khng p24 xuất hiện và giảm dần cùng với sự mất đi và xuất hiện lại KN HIV. Trong khi đó IgG kháng KN vỏ của HIV tồn tại lâu dài trong suốt thời gian bị nhiễm.

[Hình: PCR3.jpg]

4.3.2. Lựa chọn kỹ thuật xét nghiệm HIV

4.3.2.1. Nguyên tắc chung.
- Mục đích xét nghiệm.
- Thời điểm phơi nhiễm.
- Đối tượng xét nghiệm.
- Tỷ lệ nhiễm trong quần thể.
- Thời gian cần trả lời kết quả.
- Điều kiện cụ thể của phòng thí nghiệm.
- Tư vấn trước xét nghiệm.

4.3.2.2. Lựa chọn cụ thể

4.3.2.2.1. Giai đoạn ủ bệnh: 6-8 tuần kể từ khi virus HIV xâm nhập vào trong cơ thể các phương pháp phát hiện kháng thể đặc hiệu HIV thông thường (Serodia, ELISA, Test nhanh, WB) chưa thể giúp ích gì cho chẩn đoán giai đoạn này gọi là “giai đoạn cửa sổ sinh học’’. Giai đoạn này từ khi nhiễm HIV 1 tuần lễ: một số kỹ thuật có thể giúp ích chẩn đoán như:
- Phân lập virus.
- PCR.
- Phát hiện kháng nguyên p24.
- Phát hiện kháng thể Ig (kỹ thuật ELISA sandwich)

4.3.2.2.2. Giai đoạn có kháng thể
Kỹ thuật:
- Serodia.
- ELISA.
- Test nhanh.
- Western blot.

4.3.3. Nhận định kết quả.

4.3.3.1. Các phương pháp trực tiếp:
- Dương tính: kết luận dương tính.
- Âm tính: kết luận âm tính. 

4.3.3.2. Các phương pháp xét nghiệm gián tiếp:
- Mẫu thử nghiệm âm tính lần đầu: kết luận âm tính.
- Để khẳng định mẫu HIV dương tính: Mẫu huyết thanh được coi là dương tính với khi mẫu đó dương tính cả ba lần xét nghiệm bằng ba loại sinh phẩm với nguyên lý và chuẩn bị KN khác nhau.

QUI TRÌNH XÉT NGHIỆM TẠI PHÒNG HIV BỆNH VIỆN PHONG - DA LIỄU TRUNG ƯƠNG QUY HOÀ
[Hình: quy%2520trinh%2520xn%2520HIV.jpg]

5. Kết luận: Để kết luận tình trạng mẫu thử là dương tính khi:

5.1. Tính hợp lệ của thử nghiệm:
Theo đúng hướng dẫn của nhà sản xuất sinh phẩm.

5.2. Chỉ thực hiện tại các phòng thí nghiệm HIV được phép khẳng định HIV dương tính.

5.3. Theo đúng hướng dẫn sử dụng sinh phẩm và đúng phương cách xét nghiệm.

5.4. Nếu kết quả giữa các thử nghiệm không phù hợp, hẹn 3 tháng sau lấy mẫu xét nghiệm lại.
 

Cuộc sống đôi khi có những phút yếu mình, đôi khi có những phút giây lạc lối. Đôi khi ta cần lắm một câu nói, một lời động viên ý nghĩa, một sự đồng điệu kể cả từ ai đó vốn không quen.
UserPostedImage
thanks 1 người cảm ơn qwerty. cho bài viết.
express trên 12-08-2013(UTC) ngày
Quảng cáo
Offline BS Dung  
#2 Đã gửi : 31/07/2013 lúc 07:16:17(UTC)
BS Dung

Danh hiệu: Thành viên danh dự

Nhóm: Thành viên chính thức, Người điều hành chung, Tham vấn viên Diễn đàn
Gia nhập: 18-07-2013(UTC)
Bài viết: 188

Cảm ơn: 113 lần
Được cảm ơn: 356 lần trong 264 bài viết
Tóm tắt lại lần nữa cho các bạn dễ hiểu :

Xét nghiệm HIV bao gồm rất nhiều pp nhưng chia làm 2 nhóm :

1-  Xét nghiệm phát hiện kháng thể ( Gián tiếp)
2- loại xét nghiệm tốn kém phát hiện trực tiếp virus hoặc các thành phần của virus ( Trực tiếp)

Vậy khi có lo lắng bạn cần làm loại xét nghiệm nào?

trước hết bạn phải biết thời gian sau khi có nguy cơ của bạn là bao nhiêu ngày?



 Giai đoạn  từ khi nhiễm HIV 1 tuần lễ: một số kỹ thuật có thể giúp ích chẩn đoán như: ( pp trực tiếp)

- Phân lập virus.

- PCR.

- Phát hiện kháng nguyên p24. ( 28 ngày)

- Phát hiện kháng thể Ig (kỹ thuật ELISA sandwich) ( 28 ngày)

- Từ 6-8 tuần trở lên :  Giai đoạn có kháng thể (pp gián tiếp)

Kỹ thuật:

- Serodia.

- ELISA.

- Test nhanh.

- Western blot.

Kết luận như sau : Các phương pháp xét nghiệm gián tiếp:


- Mẫu thử nghiệm âm tính lần đầu: kết luận âm tính.

- Để khẳng định mẫu HIV dương tính: Mẫu huyết thanh được coi là dương tính với khi mẫu đó dương tính cả ba lần xét nghiệm bằng ba loại sinh phẩm với nguyên lý và chuẩn bị KN khác nhau.

Sửa bởi người viết 01/08/2013 lúc 01:07:32(UTC)  | Lý do: Chưa rõ

thanks 2 người cảm ơn BS Dung cho bài viết.
qwerty. trên 31-07-2013(UTC) ngày, express trên 12-08-2013(UTC) ngày
Offline BS Dung  
#3 Đã gửi : 07/08/2013 lúc 07:39:49(UTC)
BS Dung

Danh hiệu: Thành viên danh dự

Nhóm: Thành viên chính thức, Người điều hành chung, Tham vấn viên Diễn đàn
Gia nhập: 18-07-2013(UTC)
Bài viết: 188

Cảm ơn: 113 lần
Được cảm ơn: 356 lần trong 264 bài viết
Xét nghiệm HIV 3 phương pháp



- Xét nghiệm ELISA 1 (BIO-RAD) với các kháng nguyên gp160, p25, gp36

- Xét nghiệm ELISA 2 (SD) với các kháng nguyên gp 41, p24, gp36

- Xét nghiệm ELISA 3 (Abbott) với kháng nguyên peptide tổng hợp của virus HIV1, HIV2 nhóm O và M, conjugate gắn với các kháng thể kháng p24, p26.

- Xét nghiệm serodia SFD (Fujirebio) với các kháng nguyên gp41, p24, gp36

- Xét nghiệm nhanh Determine HIV1 /2 với các kháng nguyên của HIV1 (gp41), HIV2 (gp36), conjugate là các kháng thể kháng HIV1, HIV2 gắn selenium colloid.

Các chiến lược đã áp dụng:

- ELISA 1 + SERODIA + Determine HIV1/2

- ELISA 1 + ELISA 2 + Determine HIV1/2

- ELISA 1 + ELISA 3 + Determine HIV1/2

Từ năm 1996 đến nay, chúng tôi đã xét nghiệm sàng lọc 63948 bệnh nhân, trong đó có 547 bệnh nhân dương tính (tỷ lệ dương tính chung là 0,85%, tỷ lệ HIV dương tính từ năm 2000 đến nay là 1,062%) bằng chiến lược 3 xét nghiệm.

So sánh với Western Blot: mức độ phù hợp 17/17.

Uu điểm:

- Độ nhạy cao

- Độ đặc hiệu cao

- Đơn giản

- Rẻ tiền

- Kết quả nhanh

Nhược điểm:

- Không xác định được HIV1 và HIV2

- Không có khả năng định typ, không đánh giá được gánh nặng virus

Trong điều kiện hiện nay đối với các cơ sở y tế thực hành lâm sàng, chiến lược 3 xét nghiệm vẫn là một chiến lược tốt, nên áp dụng.

[Hình: attachment.php?aid=54]
  

KQ tại BV 108.
thanks 1 người cảm ơn BS Dung cho bài viết.
express trên 12-08-2013(UTC) ngày
Offline BS Dung  
#4 Đã gửi : 18/08/2013 lúc 01:29:54(UTC)
BS Dung

Danh hiệu: Thành viên danh dự

Nhóm: Thành viên chính thức, Người điều hành chung, Tham vấn viên Diễn đàn
Gia nhập: 18-07-2013(UTC)
Bài viết: 188

Cảm ơn: 113 lần
Được cảm ơn: 356 lần trong 264 bài viết
 

NGUYÊN LÝ  VÀ PHƯƠNG PHÁP XÉT NGHIỆM HIV

Có nhiều kỹ thuật xét nghiệm nhiễm HIV. Việc lựa chọn kỹ thuật xét nghiệm phụ thuộc vào mục đích, đối tượng, thời điểm phơi nhiễm và tỷ lệ nhiễm HIV trong quần thể.

xet nghiem hiv elisa 300x199 Xét  nghiệm hiv bằng elisa

Dựa trên sự biến động của các thông số sinh học trong quá trình nhiễm bệnh, các kỹ thuật xét nghiệm có thể phát hiện kháng thể kháng HIV, kháng nguyên virút, các chất liệu di truyền HIV-RNA hoặc HIV-DNA tiền virus (provirus).

Về nguyên tắc các xét nghiệm phát hiện nhiễm HIVđược chia thành hai phương pháp chính:

Phương pháp gián tiếp: phát hiện sự hiện diện của kháng thể kháng HIV trong máu hoặc các dịch tiết để xác định tình trạng nhiễm HIV

Phương pháp trực tiếp: Tìm trực tiếp thành phần tác nhân gây bệnh:

                  · Phát hiện các axit nucleotit của virút:

                              – HIV-DNA provirut (tế bào nhiễm)

                              – HIV-RNA (virút tự do trong huyết tương)

                  · Phát hiện kháng nguyên virút trong máu (p24).

 PHƯƠNG PHÁP GIÁN TIẾP

Là phương pháp phát hiện kháng thể kháng HIV để xác định tình trạng nhiễm HIV.

Tìm kháng thể kháng HIV để là phương pháp thông thường được sử dụng trong an toàn truyền máu, giám sát dịch tễ và chẩn đoán nhiễm virut HIV ở người lớn và trẻ em trên 18 tháng tuổi.

Kháng thể kháng HIV có thể được phát hiện trong máu bệnh nhân từ 1 -3 tháng sau khi nhiễm virút.

 CÁC KỸ THUẬT ELISA (Enzyme- Linked Immuno-Sorbent Assay)

ELISA gián tiếp

Kháng thể kháng HIV có trong máu bệnh nhân kết hợp đặc hiệu với kháng nguyên virút HIV đã được cố định sẵn trên giá đỡ (các giếng phản ứng trên phiến nhựa).

Phức hợp kháng nguyên -kháng thể này được nhận biết đặc hiệu bởi một cộng hợp là một kháng thể kháng immunoglobuline người (Ig) có gắn enzyme và sẽ cho phản ứng hiện màu với một cơ chất thích hợp. Giá trị mật độ quang của phản ứng màu (OD: optical density) tỷ lệ thuận với lượng kháng thể kháng HIV hiện diện trong mẫu thử.

ELISA cạnh tranh

Nguyên tắc của kỹ thuật dựa trên sự cạnh tranh giữa kháng thể kháng HIV có trong mẫu thử với cộng hợp là kháng thể kháng HIV đã gắn với enzyme để được gắn lên các kháng nguyên đã cố định trên giếng. Giá trị mật độ quang (OD) tỷ lệ nghịch với lượng kháng thể trong mẫu thử.

ELISA Sandwich

Kháng thể kháng HIV trong mẫu thử sẽ kết hợp đặc hiệu với kháng nguyên cố định trên giếng và được phát hiện bởi cộng hợp là các kháng nguyên virút gắn enzyme. Giá trị mật độ quang của phản ứng màu (OD) tỷ lệ thuận với lượng kháng thể kháng HIV hiện diện trong mẫu thử.

Kỹ thuật ELISA phát hiện đồng thời kháng nguyên và kháng thể

Một số sinh phẩm dùng kỹ thuật ELISA phát hiện đồng thời kháng nguyên virút (P24) và kháng thể kháng HIV cho phép phát hiện sớm nhiễm HIV trước giai đoạn chuyển đổi huyết thanh. Kháng thể kháng P24 và các kháng nguyên virút được gắn trên giếng sẽ gắn đặc hiệu với kháng nguyên P24 hoặc các kháng thể kháng HIV hiện diện trong mẫu thử và sẽ được phát hiện bằng phản ứng hiện màu sau khi cho cộng hợp gắn men và cơ chất.

Các sinh phẩm phát hiện đồng thời kháng nguyên P24 và kháng thể kháng HIV thường được dùng trong xét nghiệm an tòan truyền máu.

Các thế hệ sinh phẩm:

  • Sinh phẩm thế hệ thứ nhất sử dụng kháng nguyên là vi rút toàn phần được ly giải và tinh chế từ các tế bào đã gây nhiễm với HIV. Các sinh phẩm này có độ nhạy và độ đặc hiệu hạn chế.
  • Sinh phẩm thế hệ thứ hai dùng các kháng nguyên là protein tái tổ hợp hoặc protein tổng hợp. Sinh phẩm có độ nhạy và độ đặc hiệu cao hơn.
  • Sinh phẩm thế hệ ba xử dụng các kháng nguyên tái tổ hợp và các proteine tổng hợp nhưng kháng thể được phát hiện theo nguyên tắc ELISA sandwich. Độ nhạy và độ đặc hiệu được cải thiện rõ rệt.
  • Sinh phẩm thế hệ thứ tư phát hiện đồng thời kháng nguyên và kháng thể có trong mẫu thử. Sinh phẩm này cho phép phát hiện nhiễm HIV trước khi có sự chuyển đổi huyết thanh và là sinh phẩm được khuyến cáo nên lựa chọn cho kiểm tra an toàn trong truyền máu.

Các sinh phẩm ELISA ngày càng được hoàn thiện để có thể phát hiện sớm và chính xác kháng thể kháng HIV, rút ngắn thời gian cửa sổ huyết thanh. Các sinh phẩm dùng các kháng nguyên có các epitop tạo ra các kháng thể sớm và có các loại kháng nguyên cho phép phát hiện kháng thể kháng virút HIV 1 & 2, các thứ type virút và các virút HIV nhóm O.

Các ưu điểm của kỹ thuật ELISA:

-   Cho phép thực hiện đồng thời nhiều mẫu. Có thể dùng máy tự động giảm bớt thao tác cho người làm xét nghiệm, tránh sai sót và lây nhiễm.

-   Đọc kết quả bằng máy không phụ thuộc vào chủ quan của người làm xét nghiệm.

-   Có thể lưu các bảng kết quả và các thông số kỹ thuật thuận lợi cho việc kiểm tra đánh giá chất lượng xét nghiệm.

-   Giá thành xét nghiệm tương đối rẻ.

Các hạn chế của kỹ thuật ELISA :

-   Cần có sự đầu tư cho trang thiết bị ban đầu và bảo dưỡng máy móc.

-   Các sinh phẩm phải bảo quản ở nhiệt độ lạnh (4-80C)

-   Thời gian thực hiện xét nghiệm 2-3 giờ

-   Không thích hợp cho những nơi số lượng mẫu ít do phải làm nhiều chứng.

BS. Sức khỏe việt

thanks 1 người cảm ơn BS Dung cho bài viết.
avashs trên 15-11-2013(UTC) ngày
Offline thao.nt  
#5 Đã gửi : 17/01/2014 lúc 03:05:25(UTC)
thao.nt

Danh hiệu: Member

Nhóm: Thành viên mới
Gia nhập: 16-01-2014(UTC)
Bài viết: 1

Đến từ: Hà Nội

Khám nhiều cho chắc ăn big green



Update nexus 7 coupon code in 2014.
Best saving money with sony xperia z coupon code in 2014.
Offline thao.nt  
#6 Đã gửi : 17/01/2014 lúc 03:06:33(UTC)
thao.nt

Danh hiệu: Member

Nhóm: Thành viên mới
Gia nhập: 16-01-2014(UTC)
Bài viết: 1

Đến từ: Hà Nội

Tốt nhất cứ Khám nhiều cho chắc sad
Best saving money with sony xperia z coupon code in 2014.
Offline toivaban  
#7 Đã gửi : 17/01/2014 lúc 07:11:01(UTC)
toivaban

Danh hiệu: Administration

Medals:Công trạng: Vinh danh vì bạn đã tích cực tham gia và có nhiều cống hiến với cộng đồng
Nhóm: Administrators, Tham vấn viên Diễn đàn
Gia nhập: 17-10-2009(UTC)
Bài viết: 3.391
Man

Đến từ: Bà Rịa Vũng Tàu

Thanks: 395 times
Được cảm ơn: 2030 lần trong 1378 bài viết
 khám nhiều giống như hiến máu nhân đạo đúng không 
Phone Zalo
Phone Zalo 0933 432 579

DỊCH VỤ TỰ XÉT NGHIỆM & XÉT NGHIỆM HIV TẠI NHÀ

(Lay-test) - bằng que thử đặc biệt cho ra kết quả chỉ sau 20 phút.

Chính Xác-Tin Cậy- Bảo Mật-Miễn Phí.

HOTLINE: 0933 432 579


Bạn vừa có hành vi quan hệ tình dục không an toàn

Bạn lo lắng mình có nguy cơ lây nhiễm HIV!!!!

Hãy gọi 0933 432 579

72 GIỜ LO LẮNG của bạn thành 72 GIỜ VÀNG quý giá!

Hãy liên hệ với chúng tôi để được tư vấn càng sớm càng tốt.

Hãy Liên Hệ Số Điện Thoại :0933 432 579
Offline 1phut  
#8 Đã gửi : 11/08/2014 lúc 09:35:46(UTC)
1phut

Danh hiệu: Thành viên mới

Nhóm: Thành viên mới
Gia nhập: 02-08-2014(UTC)
Bài viết: 8

Đến từ: Hà Nội

Cảm ơn: 1 lần
BS Dung cho em hỏi:

Dertermine 7,5 tuần và Đo tải lượng (PCR tại viện nhiệt đới trung ương, em không dùng thuốc) 8 tuần có đủ tin cậy ko ạ? Mong BS tư vấn giúp em ạ
Rss Feed  Atom Feed
Ai đang xem chủ đề này?
Guest
Di chuyển  
Bạn không thể tạo chủ đề mới trong diễn đàn này.
Bạn không thể trả lời chủ đề trong diễn đàn này.
Bạn không thể xóa bài của bạn trong diễn đàn này.
Bạn không thể sửa bài của bạn trong diễn đàn này.
Bạn không thể tạo bình chọn trong diễn đàn này.
Bạn không thể bỏ phiếu bình chọn trong diễn đàn này.